[发明专利]一种根霉直接发酵餐厨垃圾生产富马酸的方法

权利要求书

1.一种根霉直接发酵餐厨垃圾生产富马酸的方法，包括以下步骤：

①根霉孢子悬浮液的制备；

②根霉种子液的制备；

③将餐厨垃圾滤干，并粉碎；

④按固液比（质量比）1:1至1：1.5的比率加入自来水；

⑤将混合餐厨垃圾80-125℃高温灭菌，并以2%-6%（质量体积比）的比例加入灭过菌的碳酸钙，调节pH在5.0~6.0；

⑥按20%~30%（体积比）的比例接种种子培养所得到的小菌球种子液，有氧发酵72~96h；

⑦固液分离，再提纯已过滤发酵液中的富马酸，即得到富马酸。

2.如权1所述根霉包括少根根霉或米根霉。

3.如权1所述根霉孢子悬浮液的制备方法为：用无菌水将所斜面培养获得的根霉孢子洗脱下来，用擦镜纸过滤菌丝，采用血球计数板计数，将孢子稀释为约10⁷个/mL，即得孢子悬浮液。

4.如权1所述斜面培养基组成为：甘油15-30g/L，酵母浸粉2-5g/L，琼脂粉15-30g/L，麦芽浸粉2-5g/L，牛肉膏蛋白胨2-5g/L。

5.如权1所述根霉种子液的制备方法为：将孢子悬浮液接种到种子培养基中；接种量为20-30%，控制转速150-200rpm，30-35℃培养24-48h后，形成小菌球。

6.如权1所述的种子培养基的组成为：葡萄糖20-40g/L，尿素1-5g/L，KH₂PO₄ 0.4-0.8g/L，MgSO₄·7H₂O 0.4-0.8g/L，FeSO₄ 4×10^-4-5×10^-4g/L，ZnSO₄·7H₂O 1×10^-3-2×10^-3g/L，pH2-3。

7.如权1所述的餐厨垃圾主要成分包括米和面粉类食物残余、蔬菜、动植物油、肉骨等，从化学组成上，各成分所占餐厨垃圾湿重比例为：水分（70%-90%）、干物质（10%-30%），餐厨垃圾干物质中各成分所占比例为：淀粉（30%-50%）、蛋白质（10%-20%）、粗脂肪（10%-35%）、粗纤维（2%-12%）、灰分（5%-20%）。

8.如权1所述，取餐厨垃圾，沥干，粉碎，称取餐厨垃圾（湿重）20-50g，装入到250ml锥形瓶中，按固液比1:1至1:1.5的比例加入自来水，按发酵液总体积2%-6%的添加量（质量）加入已灭菌的碳酸钙，115℃高温灭菌30min，冷却到室温，以发酵液总体积20%-30%的接种量接种小菌球种子液（制备方法如权5所述），在25℃-35℃、120-150rpm的条件下发酵72-96h，检测发酵产物，其中富马酸的积累可达8-14g/L，富马酸的产率可达0.07-0.13g/g干垃圾。

9.如权1所述，取餐厨垃圾，沥干，粉碎，称取餐厨垃圾（湿重）400-800g，加入2.5L发酵罐，按固液比1:1至1:1.5的比例加入自来水，添加发酵液总体积2%-6%质量的碳酸钙，控制 pH在5-6，以20%-30%的接种量接种小菌球种子液（制备方法如权5所述），发酵温度为25-35℃，通气量为1-2vvm，发酵周期72-120小时。检测发酵产物，其中富马酸的积累可达10-18g/L，富马酸的产率达0.09-0.18g/g干垃圾。