[发明专利]一种鉴定大豆疫霉β-微管蛋白基因核苷酸点突变及其对苯酰菌胺抗药性的方法无效
申请号: | 201210398727.0 | 申请日: | 2012-10-19 |
公开(公告)号: | CN102925565A | 公开(公告)日: | 2013-02-13 |
发明(设计)人: | 刘西莉;蔡萌;陈磊;毕扬;林东;李波涛;李健强;刘鹏飞 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/02;C12N15/11;C12N15/31;C07K14/37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 大豆 微管 蛋白 基因 核苷酸 突变 及其 苯酰菌胺 抗药性 方法 | ||
1.一种检测或辅助检测大豆疫霉中β-微管蛋白基因或对应蛋白是否存在位点突变的方法,步骤如下:
以待测大豆疫霉的基因组DNA为模板,用SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示引物对进行PCR扩增,若PCR扩增产物为288bp的片段,则所述待测大豆疫霉中β-微管蛋白基因存在或候选存在突变位点;
所述突变位点指大豆疫霉中β-微管蛋白基因的基因组序列自5’末端起第716位核苷酸为C。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述PCR扩增中,退火温度为67℃。
3.一种检测或辅助检测大豆疫霉中β-微管蛋白基因是否存在突变位点的引物对,由SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示DNA分子组成。
4.大豆疫霉中β-微管蛋白基因的一个突变位点,为大豆疫霉中β-微管蛋白基因的基因组序列自5’末端起第716位核苷酸为C。
5.一种扩增大豆疫霉β-微管蛋白基因全序列的引物对,由SEQ ID NO:5和SEQID NO:6所示DNA分子组成,PCR扩增中,退火温度为63.5℃。
6.大豆疫霉中β-微管蛋白的一个突变位点,为大豆疫霉中β-微管蛋白的自N端起第239位氨基酸为丝氨酸(Ser,S)。
7.权利要求4或6所述突变位点在鉴定大豆疫霉抗药性中的应用;所述抗药性是指对苯酰菌胺的抗药性。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:存在所述突变位点的大豆疫霉具有或候选具有对苯酰菌胺的抗药性。
9.SEQ ID NO:3所示基因。
10.SEQ ID NO:4所示蛋白。
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