[发明专利]一种在中药、保健食品或化妆品中同时检测七种非法添加减肥类化学成分的方法

说明书

技术领域

本发明属于食品药品检测技术领域，具体涉及一种在中药、保健食品或化妆品中同时检测七种非法添加减肥类化学成分的方法。 

背景技术

随着人们对健康体重的日益关注，减肥已成为爱美人士的最大话题，各类减肥产品相应而生。一些商家为了使自己的产品具有快速、明显的减肥效果，在健康产品中非法添加具有减肥效果的化学成分（如西布曲明等），这样虽然使产品有了显著的降低体重的效果，但同时对使用者的身体健康会产生危害甚至可能危及生命。因此亟需建立一种快速、准确的分析方法来检测中药、保健食品或化妆品中非法添加的减肥类化学成分。 

目前，这些成分的测定方法主要为：1、薄层色谱法（TLC），该方法简便直观，分离时间短，耐“污染”，但分离效率较低，常常有假“阳性”干扰，主要用于初筛；2、高效液相色谱法(HPLC)，该方法的优点是分离性能高，通过比较色谱峰与对照品色谱峰的保留时间及紫外光谱图，可以基本确证是否含有与对照品一致的化学成分，但对于有些同分异构体来说，鉴别仍较困难，而且高效液相色谱法利用光谱图定性易受杂质干扰；3、气相色谱-质谱法(GC-MS)，该方法准确，可靠，但检测成分必须能气化，大大限制了采用一种方法检测多个成分的可能，气相色谱-质谱法只局限于挥发性成分的检测；4、液相色谱-质谱法（HPLC-MS），它以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。样品在液相部分经色谱柱分离，质谱部分与流动相分离并被离子化后，在质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。但是，国家食品药品监督管理局药品检验补充检验方法和检验项目批准件2006004采用液相色谱-质谱法仅对麻黄碱、西布曲明、芬氟拉明三种成分三种成分进行检测；食药监办许[2010]114号文件附件2：减肥类保健食品违法添加药物的检测方法中仅对咖啡因、呋塞米、酚酞、西布曲明、芬氟拉明共5种成分进行检测。也就是说，普通 的高效液相-质谱检测目前检测西布曲明、麻黄碱、咖啡因、芬氟拉明、酚酞、呋塞米六种（两标准中有两成分重复，故总的检验成分为6个）减肥类化学成分需要使用两种检测方法，使得样品分析时间成倍增加，耗时较长，两种检验方法所需的检验时间分别长达50分钟。 

另外，2010年1月21日,欧洲药品管理局(EMA)建议在欧盟范围内暂停西布曲明上市许可,我国国家食品药品监督管理局于2010年10月30日发布通知停止生产销售使用西布曲明。西布曲明的使用安全越来越受到关注,而它的双去甲基衍生物的使用安全性未见相关研究。若患者在不知情的情况下长期、大量服用添加了西布曲明及其衍生物的减肥类保健食品，极易引起严重的后果。目前，相关部分查处在减肥类保健食品中违禁添加西布曲明化学成分的情况较多，为逃避监管部门的检测，有的不法厂家添加具有更好活性的N,N-双去甲基西布曲明。N,N-双去甲基西布曲明为白色结晶体，是西布曲明的主要活性代谢物品，用量是西布曲明的一半，减肥效果相比西布曲明明显，目前有山东维宜精细化工有限公司等生产。由于没进行安全性评价及临床试验，国内外还未有药品上市。目前对西布曲明去甲基衍生物检测的报道较少,杨春华等采用甲基化西布曲明代谢物的方法测定了西布曲明及其代谢物的总量,陈稚等采用HPLC/ESI-MS单级质谱法测定减肥保健食品中的N,N-双去甲基西布曲明。 

因此，开发一种能同时检测西布曲明、麻黄碱、咖啡因、芬氟拉明、酚酞、呋塞米和N,N-双去甲基西布曲明七种减肥类化学成分的方法显得意义深远。 

发明内容

本发明旨在克服现有检测方法的不足，提供一种在中药、保健食品或化妆品中同时检测七种非法添加减肥类化学成分的方法，可以准确、快速的检测出西布曲明，芬氟拉明，酚酞，麻黄碱，咖啡因，N,N-双去甲基西布曲明，呋塞米7种减肥类化学成分。 

为了达到上述目的，本发明提供的技术方案为： 

所述检测中药、保健食品或化妆品中七种非法添加减肥类化学成分的方法是将样品经有机溶剂萃取，超高效液相梯度洗脱分离，三重四级杆质谱检测；通过比较样品峰与对照品峰的保留时间、相对分子质量和二级质谱碎片信息，确定样品中是否非违法添加了减肥类化学成分。 

具体包括如下步骤： 

（1）将样品用有机溶剂萃取，该步骤为常规的甲醇萃取步骤； 

（2）将萃取后的样品溶液注入液质联用仪进行超高效液相梯度洗脱分离和质谱检测；该步骤中，所述液质联用仪为Quattro Premier XE三重四极杆液质联用仪；