[发明专利]一种萃取相思子碱的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种萃取相思子碱的方法，更具而言涉及一种采用超临界CO₂萃取和膜过滤技术相结合萃取相思子碱的方法。

背景技术

相思子碱（abrine）又叫相思豆碱、N-甲基色氨酸，分子式C₁₂H₁₄N₂O₂，分子量218.25，结构式：

。

高纯度相思子碱为棱柱状结晶(水)，分解点295℃，旋光度+44°(0.28g溶于10m1 0.5mol/L盐酸中)。1g溶于约100ml甲醇，微溶于水，不溶于乙醚，溶于稀酸和碱。

相思子碱存在于豆科植物相思子的种子中，广东相思子(A. fruticulosus Wall.ex Wight et Arn. )的全草等植物中。在药理研究中发现，相思子碱能明显抑制小鼠耳廓肿胀，减少小鼠耳廓重量；增加免疫小鼠胸腺、脾脏重量，提高小鼠血清溶血素水平；明显降低CCL4和异硫氰酸萘酯所致肝损伤小鼠血清中转氨酶活性及胆红素含量，保护肝损伤。还有发现对豚鼠实验性哮喘反应有抑制作用，对豚鼠过敏性休克有保护作用，能抑制磷酸组胺致大鼠皮肤血管通透性增加。

现有萃取相思子碱的方法一般采用常压提取，再采用硅胶柱、凝胶柱或制备液相方法分离。如文献“微波辅助提取-高效液相色谱分析制备鸡骨草中相思子碱和下箴刺桐碱的研究”。但是，常压提取法存在提取效率低，后续纯化工序操作复杂等缺点。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺陷和不足，提供一种萃取相思子碱的高效、操作简便的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

1）鸡骨草原料粉碎20-80目，投入萃取釜，通入液态CO₂和夹带剂，在压力20-30MPa、温度40-55℃条件下，萃取30-60min，在压力5-9MPa、温度40-60℃条件下解析，得萃取物；

2）上述萃取物用酸水溶解，用纳滤膜过滤，滤液再用反渗透膜浓缩，浓缩液调节pH5-6加乙醇溶液醇沉，滤出得沉淀物用70-99%甲醇溶液溶解重结晶2-3次，即得相思子碱。

步骤1）中所述的夹带剂为50-99%甲醇溶液，用量为原料量的1-3倍。

步骤2）中所述的纳滤膜为截留分子量400-1000的中空纤维素膜。

本发明的优点是：

a工艺利用超临界CO₂萃取，提取效率高，溶出杂质少，而且对环境友好；

b工艺采用膜分离技术，是一种物理分离过程，操作简单，而且环保、低能耗。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明。

实施例1：

鸡骨草粉碎60目，称取1kg投入萃取釜，通入液态CO₂，调节压力25MPa、温度50℃，达到上述参数，再通入90%甲醇溶液，萃取40min，在压力6MPa、温度55℃条件下解析萃取物。所得萃取物用pH3的盐酸水溶液溶解，用截留分子量400的中空纤维素膜纳滤，滤液再用反渗透膜浓缩，浓缩液调节pH6加乙醇溶液醇沉，滤出得沉淀物用85%甲醇溶液溶解重结晶3次，干燥得相思子碱860mg，经HPLC检测，含量98.5%。

实施例2：

鸡骨草粉碎80目，称取1kg投入萃取釜，通入液态CO₂，调节压力27MPa、温度45℃，达到上述参数，再通入80%甲醇溶液，萃取50min，在压力5MPa、温度60℃条件下解析萃取物。所得萃取物用pH2的硫酸水溶液溶解，用截留分子量500的中空纤维素膜纳滤，滤液再用反渗透膜浓缩，浓缩液调节pH5加乙醇溶液醇沉，滤出得沉淀物用90%甲醇溶液溶解重结晶2次，干燥得相思子碱920mg，经HPLC检测，含量97.8%。

实施例3：

鸡骨草粉碎40目，称取1kg投入萃取釜，通入液态CO₂，调节压力22MPa、温度45℃，达到上述参数，再通入60%甲醇溶液，萃取30min，在压力5MPa、温度60℃条件下解析萃取物。所得萃取物用pH3的盐酸水溶液溶解，用截留分子量600的中空纤维素膜纳滤，滤液再用反渗透膜浓缩，浓缩液调节pH5.5加乙醇溶液醇沉，滤出得沉淀物用70%甲醇溶液溶解重结晶3次，干燥得相思子碱780mg，经HPLC检测，含量98.1%。