[发明专利]用于诊断或治疗BCL2相关癌症的组合物和方法

说明书

本申请是申请号为200680039776.8、申请日为2006年9月11日的中国发明专利申请的分案申请。

发明者:Carlo M.Croce和George A.Calin

政府资助

本发明全部或部分由来自国家癌症研究所的基金号P01CA76259、P01CA81534和P30CA56036资助。政府拥有本发明的某些权利。

发明领域

本发明涉及癌症的诊断特别是BCL2相关癌症的诊断。本发明还包括用于治疗与BCL2基因和/或基因产物的过度表达相关的癌症的方法和组合物。本发明还提供了用于改进抗癌疗法例如化学疗法和其他常规癌症疗法的新的方法和组合物。

发明背景

在一百多种不同的生物（包括果蝇、线虫和人）中发现MicroRNA(miRNA,miR)。据认为miRNA在这些生物中参与许多调节发育的过程。miRNA通常从60至70个核苷酸的折叠RNA前体结构加工而来，所述前体从miRNA基因转录而来。RNA前体或加工的miRNA产物可容易被检测到，并且这些分子的缺乏可表明相应的miRNA基因的功能的缺失或丢失。

癌症是美国和全世界死亡率和发病率的重要来源。特别地，慢性淋巴细胞性白血病(“CLL”)和其他BCL2相关癌症（例如，急性髓细胞性白血病、多发性骨髓瘤、黑色素瘤、淋巴瘤(例如，滤泡性淋巴瘤、大细胞淋巴瘤、非何杰金淋巴瘤)、癌(例如，脑癌、乳腺癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、肾癌、肝细胞癌和胃癌)、血液的恶性肿瘤、实体瘤、结肠直肠癌、EB病毒相关淋巴细胞增生性疾病)是成年人的临床上重要的肿瘤性疾病（neoplastic disease）。例如，CLL是西方国家中成年人白血病的最常见形式，在美国前列腺癌的年龄校正的发病率现在超过男性中所有其他癌症的年龄校正的发病率，并且，排在肺癌之后，为该国男性癌症死亡的第二大病因。

在超过一半的报导的CLL病例中发生在13q14上的半合子和/纯合子丢失，其构成了CLL中最常见的染色体异常。经鉴定来自CLL患者的组织样品的核型具有相对少量的染色体异常，这表明观察到的13q14上的缺失的特异性和频率具有病理显著性。此外，13q14缺失也在60％的前列腺癌中发生，这表明位于13q14的一种或更多种肿瘤抑制基因参与CLL和前列腺癌的发病机理。

CLL和前列腺癌中13q14缺失的克隆纯合型和杂合型缺失的存在和非常高的频率表明该区域中的缺失与某些癌症类型的病因学相关。为了鉴定缺失区域中的基因，已对几个组使用了定位克隆。迄今为止，已就DNA和/或RNA水平上的改变在CLL的偶发性和家族性病例中鉴定和筛选了来自13q14的删除区域的总共8个基因：Leu1(BCMS或EST70/Leu1)、Leu 2(ALT1或1B4/Leu2)、Leu 5(CAR)、CLLD6、KPNA3、CLLD7、LOC51131(假定的锌指蛋白NY-REN-34抗原)和CLLD8。然而，详细的基因分析，包括详尽的杂合子丢失(LOH)、突变和表达的研究，未能证明这些基因中任何基因在致癌作用中是固有涉及的。

CLL的恶性的、大部分非分裂的B细胞过度表达Bcl2基因(Kitada,S.,等人，Blood 91:3379-3389(1998))，在通过抑制细胞死亡而促进真核细胞的存活中起着中心作用的凋亡抑制因子(Cory,S.,和Adams,J.M.,Nature Reviews 2:647-656(2002))。Bcl2的过度表达与许多类型的人癌症包括白血病、淋巴瘤和癌相关(Sanchez-Beato,M.,等人，Blood 101:1220-1235(2003))。在滤泡性淋巴瘤中和部分弥漫性B细胞淋巴淋中，发现BCL2的活化机制是染色体易位t(14;18)(q32;q21),该易位将BCL2基因置于免疫球蛋白重链增强子的控制之下，这导致该基因的表达脱离控制(Tsujimoto,Y.,等人，Science 226:1097-1099(1984);Tsujimoto,Y.,等人，Science 228:1440-1443(1985))。然而，BCL2基因在低于5％的CLL病例中与免疫球蛋白基因座紧靠(Adachi,M.,等人，J.Exp.Med.171:559-564(1990)),BCL2在大部分CLL癌症中的过度表达的机制仍然未知。