[发明专利]一种从板蓝根中高效提取、分离和纯化表告伊春的方法

权利要求书

1.本发明涉及一种从板蓝根中提取、分离和纯化表告伊春的方法，其主要特征在于：以干燥的板蓝根为原料，采用匀浆破碎酶解技术、酶辅助负压空化提取技术，絮凝除杂技术，大孔吸附树脂富集分离技术，溶剂抽提纯化技术、正相硅胶中压柱层析技术以及低温析晶和重结晶技术等一系列高效提取、分离和纯化技术手段得到纯度达98%以上的表告伊春。

2.按照权利要求1所述的匀浆破碎酶解技术，其特征在于：使用的酶为纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的混合酶，酶溶液浓度为250~500U/mL，通过柠檬酸缓冲液调节pH值至4.0~5.0，按液固比30:1~50:1与中药材板蓝根匀浆1~3min。

3.按照权利要求1所述的酶辅助负压空化提取技术，其特征在于：将含有酶的匀浆液转移入负压空化提取装置中，在温度为35~45°C，压力为0.07~0.09Mpa下，连续负压空化提取，每次60~90min,提取1~3次。

4.按照权利要求1所述的絮凝除杂技术，其特征在于：提取液中加入95%的乙醇，充分搅拌至溶液醇浓度达65%左右，0~4°C冷藏12~24h，过滤，滤渣弃去，滤液浓缩至干得到固形物。

5.按照权利要求1所述的大孔吸附树脂富集分离技术，其特征在于：所用树脂包括D101，HPD100，AB-8和ADS-17广谱非极性大孔吸附树脂，所有大孔吸附树脂均采用湿法装柱，保留适当液面，将醇沉后所得的固形物用蒸馏水溶解后，进行大孔吸附树脂柱吸附，上样量为0.5~1BV，流速为0.5~1BV/h，充分吸附后，用蒸馏水5~8BV充分洗去杂质，10%乙醇10~15BV解吸目标化合，合并解析液，浓缩至干得到固形物。

6.按照权利要求1所述的溶剂抽提纯化技术，其特征在于：将得到的树脂富集纯化后的固形物加入蒸馏水溶解，以等体积的乙酸乙酯为萃取溶剂，萃取3~5次，减压浓缩至干后得到富含表告伊春的粗品。

7.按照权利要求1所述的正相硅胶中压柱层析技术，其特征在于：所用样品为萃取后得到的粗品，所用层析硅胶为300~400目，所用有机试剂包括正己烷和乙酸乙酯，预先称取质量为样品量8~10倍的层析硅胶，采用湿法装柱，将样品用少量乙酸乙酯溶解，加入与样品量相同的层析硅胶拌匀后在水浴锅上炒样至干，然后装入预先装好的层析硅胶柱上，先后以10~20BV不同比例梯度的正己烷和乙酸乙酯溶液连续中压洗脱，收集洗脱液，每份1/40~1/20BV，利用硅胶薄层层析(TLC)检测洗脱液成分，合并相同部分，展开剂为正己烷:乙酸乙酯=20:1~1:1。

8.按照权利要求1所述的低温析晶和重结晶技术，其特征在于：所用溶剂为乙酸乙酯和甲醇，所用溶剂的比例为乙酸乙酯:甲醇=1:1~5，低温析晶和重结晶的温度为-10~25°C。