[发明专利]采用免疫荧光试剂盒测定人脑型脂肪酸结合蛋白的方法

说明书

 

技术领域：

本发明涉及医学技术领域，具体涉及采用免疫荧光试剂盒测定人脑型脂肪酸结合蛋白的方法。

背景技术：

自标记免疫测定技术出现以来，在医学和生物学研究中被广泛应用，但是现有免疫试剂盒还不可以同时测定重组或天然的人脑型脂肪酸结合蛋白,且现有的免疫试剂盒在测定过程中抗干扰分析特异性差，使测定结果不稳定、偏差大。

发明内容：

本发明的目的是提供采用免疫荧光试剂盒测定人脑型脂肪酸结合蛋白的方法，它可以同时测定重组或天然的人脑型脂肪酸结合蛋白,且在使用免疫荧光试剂盒测定过程中使用特殊的荧光物质为发光材料，使测定结果更稳定、偏差小。

为了解决背景技术所存在的问题，本发明采用以下技术方案：它的测定方法分为各种标本的采集方法和采用免疫荧光试剂盒测定各个标本中人脑型脂肪酸结合蛋白方法。

本发明中主要采集是的细胞培养物上清液、人全血、血清、血浆和组织均浆标本，各种标本的采集方法为：1、细胞培养物上清液的采集：细胞培养物进行离心后收集上清，并将标本保存于-20℃，且应避免反复冻融；2、全血收集：采用抗凝管采血，在采血管里先加入EDTA抗凝剂，将采集血样加入并摇匀备用，指尖，耳垂末梢或静脉样本采集后应尽可能立即使用；3、血清的采集方法为：将血清标本置于室温4℃的情况下2小时，过夜后采用离心机进行离心20分钟，取上清液即可检测；4、血浆的采集：用EDTA或肝素作为抗凝剂，使血浆标本采集后30分钟内使用，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融；5、组织均浆的采集：将动物的组织均浆标本先用PBS洗涤，除去多余血液，均浆后放在20mlPBS中于-20℃放置过夜，第二天，经过二次反复冻融破膜，将均浆采用离心机进行离心5分钟，取上清液即可检测。

采用免疫荧光试剂盒测定各个标本中人脑型脂肪酸结合蛋白的方法为：先将上述的各标本在使用前置室温，然后对各个标本稀释，稀释方法为：取10～20ul标本样品，加入1ml的样品稀释液，轻轻摇匀后待用，取稀释后样品60～90ul，加到免疫荧光层析板上的加样孔里，反应3～15分钟，将已经反应好的免疫荧光层析板放入免疫荧光分析仪扫描窗口，通过600～660nm波长下激发，650～680nm波长接收荧光信号，测量免疫荧光层析板里硝酸纤维素膜上的荧光信号。

本发明具有以下有益效果：它可以同时测定重组或天然的人脑型脂肪酸结合蛋白,且在使用免疫荧光试剂盒测定过程中使用特殊的荧光物质为发光材料，使测定结果更稳定、偏差小。

具体实施方式：

本具体实施方式采取以下技术方案：它的测定方法分为各种标本的采集方法和采用免疫荧光试剂盒测定各个标本中人脑型脂肪酸结合蛋白方法。

本发明中主要采集是的细胞培养物上清液、人全血、血清、血浆和组织均浆标本，各种标本的采集方法为：1、细胞培养物上清液的采集：细胞培养物进行离心后收集上清，并将标本保存于-20℃，且应避免反复冻融；2、全血收集：采用抗凝管采血，在采血管里先加入EDTA抗凝剂，将采集血样加入并摇匀备用，指尖，耳垂末梢或静脉样本采集后应尽可能立即使用；3、血清的采集方法为：将血清标本置于室温4℃的情况下2小时，过夜后采用离心机进行离心20分钟，取上清液即可检测；4、血浆的采集：用EDTA或肝素作为抗凝剂，使血浆标本采集后30分钟内使用，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融；5、组织均浆的采集：将动物的组织均浆标本先用PBS洗涤，除去多余血液，均浆后放在20mlPBS中于-20℃放置过夜，第二天，经过二次反复冻融破膜，将均浆采用离心机进行离心5分钟，取上清液即可检测。

采用免疫荧光试剂盒测定各个标本中人脑型脂肪酸结合蛋白的方法为：先将上述的各标本在使用前置室温，然后对各个标本稀释，稀释方法为：取10～20ul标本样品，加入1ml的样品稀释液，轻轻摇匀后待用，取稀释后样品60～90ul，加到免疫荧光层析板上的加样孔里，反应3～15分钟，将已经反应好的免疫荧光层析板放入荧光免疫分析仪扫描窗口，通过600～660nm波长下激发，650～680nm波长接收荧光信号，测量免疫荧光层析板里硝酸纤维素膜上的荧光信号。

本具体实施方式具有以下有益效果：它可以同时测定重组或天然的人脑型脂肪酸结合蛋白,且在使用免疫荧光试剂盒测定过程中使用特殊的荧光物质为发光材料，使测定结果更稳定、偏差小。