[发明专利]一种荧光分析方法和装置

说明书

技术领域

本发明属于体外检测技术领域，具体地涉及一种基于测量荧光强度的分析方法和装置。

背景技术

在免疫检测领域中，常常需要对各类抗原或抗体进行定性或定量检测。现有技术中，以“竞争抑制和双抗夹心”为基础衍生出多种免疫反应分析方法，如：放射免疫法、酶联免疫法、化学发光法、时间分辨荧光法和荧光免疫法等，可用于确定病原微生物，对人体的特异性蛋白定量检测，从而对疾病进行辅助诊断或监测等等，用途非常广泛。这类免疫反应分析方法，通常将捕获抗体固定于固相载体，然后与抗原(目标蛋白)反应，洗涤后再与标记抗体反应，洗涤，最后检测放射性强度、溶液吸光度或光信号等，从而报告检测样本中目标蛋白的浓度。上述方法的自动化免去了人工洗涤的烦琐，但正因为自动化，使得仪器体积庞大价格昂贵，一般只在大型实验室使用。

斑点金免疫渗滤技术(dot immunogold filtration assay,DIGFA)是Spielberg等最初于1989年通过检测抗HIV建立，随着胶体金技术、材料技术以及计算机的高速发展，斑点金免疫渗滤技术日臻完备，作为以膜为载体的胶体金快速诊断技术中的一种，具有检测快速、便捷、不需要特殊设备、结果判断直观等优点。由于该方法只需肉眼观察即可，非专业人士也可操作，使急诊、基层医院、病人床边和现场等远离大型实验室的地方开展相关检测成为可能，所以应用范围相当广泛。如：已应用于多种寄生虫病标志物、心脏病标志物、传染性疾病标志物、毒物、性传播疾病和其他生化指标的检测等，在其他领域如食品卫生、环境保护等领域都有报道。

DIGFA法已经超过20年的发展，但其基本的工作原理并未改变，这决定了到目前为止，它只用于定性或半定量检测且灵敏度也不如前述的定量免疫分析方法，进一步的应用遇到了瓶颈。因此，本领域急需对现有的DIGFA方法进行变革，在赋予其高灵敏度和定量准确的新优势的同时，保持其快捷、简便、成本低廉等特点，从而进一步扩展其应用领域。

发明内容

本发明提供了一种渗漏检测装置，用于定量检测样品中的待测物。

本发明提供了一种定量检测待测物的检测方法，所述方法灵敏度高，定量准确。

本发明还提供了一种定量检测待测物的检测装置。

在本发明第一方面中，提供了一种渗漏检测装置，该渗漏检测装置包括：

(a1)包含检测区的多孔膜，其中，所述的检测区包含固定化捕获剂，并且

所述固定化捕获剂能同时与可流动的荧光物质和可流动的第一结合剂结合，从而形成“荧光物质－捕获剂－第一结合剂”复合物；所述第一结合剂可与待测物结合，且所述待测物能与第二结合剂结合，从而形成“第一结合剂－待测物－第二结合剂”复合物；

从而当检测区接触所述的荧光物质、第一结合剂、待测物和第二结合剂后，在检测区形成“荧光物质－捕获剂－第一结合剂－待测物－第二结合剂”复合物，其中，所述的第二结合剂被吸光物质标记，且所述吸光物质影响所述荧光物质的荧光强度；

(a2)位于多孔膜下方的吸收垫，所述吸收垫具有吸收能力，使得加至检测区的样品和液体透过多孔膜并被吸收垫吸收。

在另一优选例中，所述固定化捕获剂为链亲和素，所述荧光物质被生物素标记，所述第一结合剂被生物素标记。

在另一优选例中，所述的第一结合剂和第二结合剂的种类或数量为一种或多种；较佳地，可同时用于检测一种或多种待测物。

在另一优选例中，所述的渗漏检测装置是定量检测装置。

在另一优选例中，所述待测物为抗原或抗体。

在另一优选例中，所述的待测物是抗原，则所述的第一结合剂和第二结合剂是可同时结合于所述抗原的抗体；或者所述的待测物是抗体，则所述的第一结合剂和第二结合剂是可同时结合于所述抗体的抗原或所述抗体的抗体(抗抗体)。

在本发明第二方面中，提供了一种渗漏检测装置，该渗漏检测装置包括：

(b1)包含检测区的多孔膜，其中，所述的检测区包含固定化捕获剂，并且

所述固定化捕获剂能同时与可流动的荧光物质和可流动待测物等同物结合，从而形成“荧光物质－捕获剂－待测物等同物”复合物；所述待测物等同物能与结合剂结合，从而形成“待测物等同物－结合剂”复合物，且所述结合剂能与待测物结合；

从而当检测区接触所述的荧光物质、结合剂、待测物和待测物等同物后，在检测区形成“荧光物质－捕获剂－待测物等同物－结合剂”复合物，其中，所述的结合剂被吸光物质标记，且所述吸光物质影响所述荧光物质的荧光强度；