[发明专利]一种吉利柘树素B的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然产物分离领域，特别是涉及一种吉利柘树素B的制备方法。

背景技术

吉利柘树素B（Gericudranin B），是一种黄酮醇类化合物，分子式：C₂₉H₂₄O₉，分子量：410.38，黄色粉末，mp174℃。吉利柘树素B主要存在于桑科(Moraceae)柘树Cudrania tricuspidata Bureau的茎皮中。

现代药理研究表明，吉利柘树素A具有细胞毒活性。对人型肿瘤细胞的ED₅₀(μg/ml)为皮肤癌CRL1579为13.12，皮肤癌L0X-IMVI为31.26，白血病MOLT-4F为23.07，结肠癌KM12为28.05，肾癌UO-31为9.78。

经文献检索，尚无适用于高纯度吉利柘树素B的提取纯化方法报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种吉利柘树素B的制备方法，该方法具有工艺简单，提取完全，高效节能的优点。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种吉利柘树素B的制备方法，其特征在于：以柘树茎皮为原料，采用超临界二氧化碳萃取，解析液加入活性炭回流脱色，脱色液加入超滤膜超滤，透过液再加入纳滤膜浓缩，浓缩液加水分散，加入聚酰胺柱吸附，先用水洗脱，再用5-7BV50%乙醇溶液洗脱，收集高浓度流分，减压浓缩，浓缩液采用制备型高效液相色谱仪进行分离纯化，收集目标流分，浓缩至小体积，放置结晶，滤出结晶，干燥即得吉利柘树素B产品。

所述超临界二氧化碳萃取温度为38-50℃，萃取压力为30-42MPa，萃取时间为1-2h，二氧化碳流量为3-5ml/g原料/min，夹带剂为65-80%乙醇，用量是占总萃取溶剂的体积百分比为5-8%。

所述活性炭为药用活性炭，用量占原料质量的0.3-0.8%。

所述超滤膜为截留分子量2000-5000的中空纤维素超滤膜，纳滤膜为截留分子量200-300的中空纤维素纳滤膜。

所述高效液相色谱以反相键合硅胶为固定相，甲醇水溶液为流动相。

本发明的优势在于：本发明方法简单易行，超临界萃取提取率高；膜过滤技术进行分子截留，属于物理方法，常温下进行，既实现了除杂，又浓缩了物料，过程中不造成成分分解，操作简单，耗能少；采用聚酰胺树脂对萃取液纯化，树脂处理量大，洗脱溶剂简单，树脂可重复利用；所用的反相高效液相制备色谱，具有分离度高、重现性好、分离时间短、制备量大等优点，分离的到产品纯度可达98%以上。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。

实施例1：

将柘树茎皮粉碎，取1kg，置于萃取器中，以70%乙醇溶液作为夹带剂，用量是占总萃取溶剂的体积百分比为8%，进行超临界二氧化碳萃取，萃取温度为48℃，萃取压力为42MPa，萃取时间为2h，二氧化碳流量为4ml/g原料/min，解析液加入8g药用活性炭回流脱色，脱色液加入截留分子量5000的中空纤维素超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量300的中空纤维素纳滤膜浓缩，浓缩液加水分散，加入聚酰胺吸附，先用水洗脱，再用5BV50%乙醇溶液洗脱，收集高浓度流分，减压浓缩，浓缩液用制备型高效液相色谱仪进行分离纯化，以C18反相键合硅胶为固定相，55%甲醇水溶液为流动相，紫外在线监测，检测波长为297nm，收集目标流分，浓缩至小体积，放置结晶，滤出结晶，干燥即得吉利柘树素B产品，含量98.6%。

实施例2：

将柘树茎皮粉碎，取1kg，置于萃取器中，以80%乙醇溶液作为夹带剂，用量是占总萃取溶剂的体积百分比为5%，进行超临界二氧化碳萃取，萃取温度为38℃，萃取压力为30MPa，萃取时间为1h，二氧化碳流量为5ml/g原料/min，解析液加入5g药用活性炭回流脱色，脱色液加入截留分子量3000的中空纤维素超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量200的中空纤维素纳滤膜浓缩，浓缩液加水分散，加入聚酰胺吸附，先用水洗脱，再用6BV50%乙醇溶液洗脱，收集高浓度流分，减压浓缩，浓缩液用制备型高效液相色谱仪进行分离纯化，以C18反相键合硅胶为固定相，55%甲醇水溶液为流动相，紫外在线监测，检测波长为297nm，收集目标流分，浓缩至小体积，放置结晶，滤出结晶，干燥即得吉利柘树素B产品，含量99.1%。

实施例3：