[发明专利]一种解决大豆转化不定芽条难以生根的无菌嫁接方法

权利要求书

1.一种解决大豆转化不定芽条难以生根的无菌嫁接方法，其特征在于包括如下步骤：

（a）将经过常规遗传转化处理和筛选的大豆芽条从母体上分割开，作为接穗；   

（b）大豆种子经常规方法灭菌后接种到培养基上，25℃黑暗培养，取3~8天龄小苗，在子叶下方5mm处横切，弃除上方的子叶和上胚轴，得到带有胚根的下胚轴，作为砧木；

其中所述培养基为含有0~2mg/L BA的MSB₅培养基； 

（c）在无菌条件下，将步骤（a）获得的接穗嫁接到步骤（b）获得的砧木上；

（d）将嫁接有接穗的砧木转移到与步骤（b）相同组成的培养基上，光照培养；

（e）待接穗和砧木接口愈合，接穗芽条有明显的伸长生长后，取出嫁接苗，进行栽种。

2.如权利要求1所述的解决大豆转化不定芽条难以生根的无菌嫁接方法，其特征在于步骤（b）所述MSB₅培养基含有0mg/L 的BA。

3.如权利要求1所述的解决大豆转化不定芽条难以生根的无菌嫁接方法，其特征在于步骤（b）所述小苗的苗龄为5天。

4.如权利要求1所述的解决大豆转化不定芽条难以生根的无菌嫁接方法，其特征在于步骤（c）所述嫁接是采用插接法，在下胚轴切口中央挖一小孔，所述小孔深5毫米；刮掉芽条的茎基部的表皮，然后插到小孔中完成嫁接。

5.如权利要求1所述的解决大豆转化不定芽条难以生根的无菌嫁接方法，其特征在于步骤（c）所述嫁接是采用劈接法，在砧木形态学上端横切面的中部竖着向下切出切口，所述切口深0.5厘米，把芽条基部切成“V”型，插入砧木切口中完成嫁接。