[发明专利]一种大丁香素的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药活性成分的制备方法，具体地是一种从榆绿木树皮中制备大丁香素的方法。

背景技术

大丁香素（Grandinin），分子式：C₄₆H₃₄O₃₀，分子量：1066.75，是从使君子科(Combretaceae) 榆绿木Anogeissus acuminata var.lanceolata Wall.的树皮中提取分离的一种鞣质类活性成分。大丁香素细胞毒活性，对黑色素瘤(RPMI-7951)的ED50为0.10μg/ml。 

目前，国内对大丁香素的研究较少，尚处于起步阶段。因此，研究出一种制备大丁香素的方法是非常必要的，对于扩大药源以及余甘子的综合利用具有很重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种操作简单，产品纯度较高的大丁香素制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：

（1）超临界二氧化碳流体萃取榆绿木树皮中的油脂类物质，残留物用乙醇进行连续逆流超声提取后得到提取液；

（2）提取液浓缩，加入明胶溶液，离心，沉淀物用丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初步纯化液；

（3）纯化液浓缩，上大孔树脂柱纯化，水和乙醇水溶液洗脱，洗脱液浓缩，冷冻干燥即得大丁香素。

步骤（1）中所述超临界萃取温度为38-45℃，压力为25-30MPa，时间为50-60min。

步骤（1）中所述乙醇为70-85%的乙醇溶液溶液，用量为5-10倍量(V/W)，超声频率为25-35KHz。

步骤（2）中所述明胶溶液浓度为3-6%，丙酮水溶液浓度为50%。

步骤（3）中所述大孔树脂可选HPD-400、D101或ADS-17型，洗脱剂为75%的乙醇水溶液。

综上所述，本发明存在以下优点：本工艺采用连续逆流超声提取的方法提取大丁香素，提高了提取效率，节省了溶剂；70-85%的乙醇溶液作为提取溶剂，减少了多糖的溶出；采用大孔树脂分离大丁香素，成本低，分离效果好。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

榆绿木树皮粉碎，取1kg，放入超临界萃取装置中，在温度为38℃，压力为25MPa下萃取50min，残留物加8L80%的乙醇溶液进行连续逆流超声提取，超声频率为25KHz，过滤，合并提取液，浓缩，加入浓度为3%明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，离心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初步纯化液，上1LHPD-400大孔树脂柱，吸附完成后，先用4L水洗脱，再用4L75%乙醇溶液洗脱，控制流速为3ml/min，收集富含大丁香素的洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得大丁香素1.18g。

实施例2： 

榆绿木树皮粉碎，取1kg，放入超临界萃取装置中，在温度为45℃，压力为30MPa下萃取50min，残留物加5L70%的乙醇溶液进行连续逆流超声提取，超声频率为35KHz，过滤，合并提取液，浓缩，加入浓度为6%明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，离心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初步纯化液，上1LHPD-400大孔树脂柱，吸附完成后，先用5L水洗脱，再用5L75%乙醇溶液洗脱，控制流速为4.5ml/min，收集富含大丁香素的洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得大丁香素1.27g。

实施例3： 

榆绿木树皮粉碎，取1kg，放入超临界萃取装置中，在温度为40℃，压力为30MPa下萃取60min，残留物加10L70%的乙醇溶液进行连续逆流超声提取，超声频率为30KHz，过滤，合并提取液，浓缩，加入浓度为4.5%明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，离心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初步纯化液，上1LADS-17大孔树脂柱，吸附完成后，先用3L水洗脱，再用6L75%乙醇溶液洗脱，控制流速为3.5ml/min，收集富含大丁香素的洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得大丁香素1.22g。

实施例4：