[发明专利]杂色豹皮花总甾体皂苷提取物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物分离领域，特别是涉及杂色豹皮花总甾体皂苷提取物及其制备方法。

背景技术

杂色豹皮花Stapelia variegata L.为萝藦科豹皮花属植物，是中国的特有植物，分布在非洲及中国大陆南方等地，目前已由人工引种栽培。杂色豹皮花的主要化学成分为甾体皂苷类化合物。药理研究表明，这些杂色豹皮花甾体皂苷均具有一定的溶血活性。

目前对杂色豹皮花的研究较少，尚未见从杂色豹皮花提取制备甾体皂苷的方法专利和文献报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供杂色豹皮花总甾体皂苷提取物及其制备方法，为杂色豹皮花总甾体皂苷制备提供一种简便易行的方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案来实现的：

杂色豹皮花总甾体皂苷提取物及其制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）取杂色豹皮花地上部分粉碎，加生物酶酶解1-3天，得酶解原料；

2）将上述步骤所得酶解原料加入萃取釜，采用超临界CO₂萃取，以乙醇溶液为夹带剂，萃取2-3小时，解析萃取液回收试剂，得到萃取物；

3）将上述所得萃取物，加热水分散，加入大孔树脂柱吸附，乙醇溶液洗脱，收集洗脱液浓缩成浸膏，加入丙酮至沉淀不再产生，过滤，沉淀经低温干燥即得产品。

步骤1）所述生物酶可选果胶酶、纤维素酶和淀粉酶中的任一种，用量为原料重量的0.1-0.8%。

步骤2）所述超临界CO₂萃取条件为：萃取温度为48-60℃，萃取压力为23-35MPa，CO₂流量为20-25L/h，萃取时间为3-6h，分离釜Ⅰ温度为35-50℃，压力为8-12MPa，分离釜Ⅱ温度为28-40℃，压力为4-8MPa。

步骤3）中所述大孔树脂可选D101、AB-8或HPD100中的一种。

步骤3）中所述大孔树脂洗脱，依次以水、30%-40%乙醇、70%-85%乙醇洗脱，收集70%-85%乙醇洗脱部分。

本发明的有益效果是：采用生物酶解原料，提高了提取率，缩短了提取时间；方法采用超临界CO₂萃取，提取时间短，效率高，能耗较低，绿色环保；采用大孔树脂富集分离，大孔树脂可多次利用，降低了生产成本。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

取杂色豹皮花地上部分粉碎，称量10kg加入2倍量pH5的酸水拌湿，加36g纤维素酶，常温酶解2天，酶解原料加入萃取釜，加入超临界CO₂萃取釜中，设置设备参数：萃取温度为48℃，萃取压力为35MPa，分离釜Ⅰ温度为50℃，压力为10MPa，分离釜Ⅱ温度为37℃，压力为6MPa。通入液体CO₂，达到上述参数后，调节CO₂流速22L/h，并夹带乙醇5L/h，萃取3h，解析萃取液回收试剂，收集杂色豹皮花甾体皂苷萃取物，加热水分散后加入D101大孔树脂柱吸附，依次用水、30%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减压回收试剂，浓缩成浸膏，边搅拌边加入丙酮至沉淀不再产生，过滤，沉淀经低温干燥得杂色豹皮花总甾体皂苷，其中甾体皂苷含量为84%。

实施例2：

取杂色豹皮花地上部分粉碎，称量10kg加入2.5倍量pH4的酸水拌湿，加80g纤维素酶，常温酶解3天，酶解原料加入萃取釜，加入超临界CO₂萃取釜中，设置设备参数：萃取温度为60℃，萃取压力为27MPa，分离釜Ⅰ温度为40℃，压力为12MPa，分离釜Ⅱ温度为30℃，压力为8MPa。通入液体CO₂，达到上述参数后，调节CO₂流速20L/h，并夹带乙醇6L/h，萃取4.5h，解析萃取液回收试剂，收集杂色豹皮花甾体皂苷萃取物，加热水分散后加入HPD100大孔树脂柱吸附，依次用水、35%乙醇、80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压回收试剂，浓缩成浸膏，边搅拌边加入丙酮至沉淀不再产生，过滤，沉淀经低温干燥得杂色豹皮花总甾体皂苷，其中甾体皂苷含量为83%。

实施例3：