[发明专利]基于表面等离子体增强能量转移生物传感器的构建方法

权利要求书

1.一种基于表面等离子体增强能量转移生物传感器的构建方法，其特征在于步骤如下：

1）蛋白质包覆的荧光金纳米团簇的制备：

在反应容器中依次加入氯金酸溶液和蛋白质溶液，在37°C水浴中避光磁力搅拌下反应10分钟后，逐滴加入浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液，调节体系的pH为12.0，然后继续反应36小时，得到蛋白质包覆的荧光金纳米团簇的粗产物，将粗产物用超滤膜在6000转/分钟的转速下超滤离心30分钟，弃掉下清液，将分离后的蛋白质包覆的荧光金纳米团簇重新分散在10倍体积的超纯水中，在4°C下避光保存；

2）巯基乙胺修饰的金纳米粒子的制备：

在反应容器中依次加入高纯水、巯基乙胺溶液和氯金酸溶液，磁力搅拌下室温避光反应20分钟，然后迅速加入新配置的硼氢化钠溶液，剧烈搅拌避光反应30分钟，即得到酒红色的巯基乙胺修饰的金纳米粒子溶液，在4°C下避光保存；

3）基于表面等离子体增强能量转移生物传感器的实验体系构建：

在一组离心管中分别加入巯基乙胺修饰的金纳米粒子溶液、超纯水和pH为5.0的磷酸-醋酸-硼酸缓冲溶液作为测试容器，然后在各测试容器中分别加入浓度为0.1-4.0μg/mL的肝素钠标准溶液和待测溶液，混合均匀后室温反应20分钟，最后向反应体系中加入蛋白质包覆的荧光金纳米团簇溶液，反应20秒后测定体系荧光强度。

2.根据权利要求1所述基于表面等离子体增强能量转移生物传感器的构建方法，其特征在于：所述蛋白质为胰蛋白酶、人血清白蛋白、溶菌酶、胰岛素或胃蛋白酶。

3.根据权利要求1所述基于表面等离子体增强能量转移生物传感器的构建方法，其特征在于：所述氯金酸溶液的浓度为25.4mmol/L，蛋白质溶液浓度为30mg/mL，巯基乙胺溶液浓度为213mmol/L，硼氢化钠溶液浓度为10mmol/L，氯金酸溶液与蛋白质溶液的体积比为1:1，高纯水、巯基乙胺溶液、氯金酸溶液和硼氢化钠溶液的体积比为37.5：0.4：2.23：0.01。

4.根据权利要求1所述基于表面等离子体增强能量转移生物传感器的构建方法，其特征在于：所述磷酸-醋酸-硼酸缓冲溶液浓度为40mmol/L，磷酸、醋酸和硼酸的重量比为98：60：62。

5.根据权利要求1所述基于表面等离子体增强能量转移生物传感器的构建方法，其特征在于：所述巯基乙胺修饰的金纳米粒子溶液、超纯水、磷酸-醋酸-硼酸缓冲溶液与蛋白质包覆的荧光金纳米团簇的体积比为300：1200：500：50。