[发明专利]精子分选仪

说明书

技术领域

本发明涉及细胞生物技术领域，特别涉及一种精子分选仪。

背景技术

现有的传统流式细胞仪，如授权号为：CN98813255.9，名称为：以少量精细胞对哺乳动物进行有性别选择的授精的专利，其公开了一种对分类所需的细胞改进的流失细胞计数仪系统，该系统工作原理为：待测标本制备成单细胞悬液通过荧光染色后进入充满鞘液的流动室，鞘液压力与样品流压力是不同的，当二者的压力差异达到一定程度时，鞘液裹挟着样品流中细胞排成单列逐个经过激光聚焦区。如果我们将细胞中感兴趣的部分特异性的标上荧光染料，那么这些染料将在细胞通过激光检测区时受激光发出特定波长的荧光,通过一定波长选择通透性的滤色片,我们可将不同波长的散射光、荧光信号区分开来，并送到不同的光电倍增管中，经过一系列的信号转换、放大，数字化处理，我们就可以在计算机直观的统计染上各种荧光染料的细胞各自的百分率。选择不同的单克隆、克隆抗体及荧光染料，我们可以同时测定一个细胞上的多种不同特征；如果对具有某种特征的细胞有兴趣，我们还可以利用流式的分选功能将其分选出来，以便进一步培养、研究。

在哺乳动物中，决定动物性别的关键是其所携带不同的性染色体。例如正常双倍体黄牛总共有60条染色体，其中公牛为58条常染色体，1条X染色体，1条Y染色体；而母牛为58条常染色体，2条X染色体。当经过减数分裂形成单倍体的配子后，x精子携带X染色体，它与卵子受精后产生雌性后代；Y精子携带Y染色体，它与卵子受精后产生雄性后代。在哺乳动物（家畜）中，通常x精子的DNA含量比Y精子的DNA含量多3.0~4.5，可通过传统流式细胞仪利用荧光染色将这个差异分辨出来，从而达到筛选的目的。

传统流式细胞仪在分离精子时，采用荧光染料Hoechst33342进行染色，通常先将精子稀释到1.5亿/毫升，加入Hoechst33342至40微克/毫升，在35℃水浴中染色60分钟。染色后精子通过流式细胞仪时，在细微的进样管液流中排成单列，高速射出喷嘴后逐个与激光交截。精子上的荧光染料Hoechst33342被氩离子紫外激光(~350nm)激发，产生蓝色激发光(~460nm)。由于x精子所含有DNA比Y精子多，结合上比较多的Hoechst33342，所激发出的荧光就比Y精子强(图1)。流式细胞仪根据荧光强度的差别分辨出哪个是x精子，哪个是Y精子。同时，由于喷嘴产生高频率震动，高速喷射出的液流形成了包含单个x精子或者Y精子的微小液滴。当液滴被充上正电荷或者负电荷后，在电场力的引导下，分别落入不同的收集容器中，x精子和Y精子得以分离，但由于传统流式细胞仪针对的对象是所有的细胞，无法根据精子的特性进行快速、有效的区分，导致分离效率及分离精度低下。

发明内容

（一）要解决的技术问题

本发明要解决的技术问题是：如何提供一种精子分选仪，以提高分离精子的效率和精度。

（二）技术方案

为解决上述技术问题，本发明提供了一种精子分选仪，所述分选仪包括：喷嘴，所述喷嘴下端与喷针连接，所述喷针的针头为楔形。

优选地，所述喷嘴内部为扁平椭圆形。

本发明还公开了一种精子分选仪，所述分选仪包括：激光激发器，所述激光激发器为发射功率为150mw的紫外激光的激发器。

优选地，所述激光激发器发射的紫外激光为355nm。

优选地，所述分选仪采用3片镜片经过3次反射后，激发染色的精子。

本发明还公开了一种精子分选仪，所述分选仪包括：传感器，所述传感器的入口处设有长波滤波片。

优选地，所述传感器设有两个，分别设于与所述激光激发器发射的激光的入射方向相对处和与所述激光激发器发射的激光的入射方向呈90度处。

优选地，所述传感器中设有非线性放大器。

优选地，所述传感器为光电倍增管。

优选地，所述光电倍增管为日本Hamamatsu公司的R928光电倍增管。

（三）有益效果

本发明在传统流式细胞仪的基础上进行改进，使得分离精子的效率和精度有了较大幅度的提高，分离的速度提高近3~5倍。

附图说明

图1是传统流失细胞仪所激发的x精子和Y精子的荧光差异图；

图2是按照本发明一种实施方式的精子分选仪中喷嘴下端的45度俯视图；

图3是图2所示的精子分选仪中喷嘴下端的正视图；

图4是图2所示的精子分选仪中喷嘴下端的仰视图；

图5是图2所示的精子分选仪中喷嘴下端的侧视图；