[发明专利]一种制备印度苦木素类化合物的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药化学领域，涉及一种制备印度苦木素类化合物的方法。

背景技术

苦木科(Simaroubaceae)植物，主要分布于热带和亚热带地区。我国有4属，约10种，分布于长江以南各省，是一类重要的药用植物资源。该科植物所含化学成分主要为苦木苦味素(Quassinoids)和生物碱，其次为三萜、甾醇、皂苷、香豆素、醌类等。印度苦木Quassia indica (Gaertn.) Nooteboom中分离得到苦木素类化合物印度苦木素C和印度苦木素X。印度苦木素C和X均具有细胞毒活性，体外对KB细胞IC₅₀分别为1.00μg/mL、0.60μg/mL；印度苦木素X还具有抗肿瘤活性，浓度为10μg/mL时刻抑制中性白细胞粘附于由肿瘤坏死因子诱导的内皮细胞。

现有技术中，尚没有适用于印度苦木素类化合物工业化大生产的制备工艺报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备印度苦木素类化合物的方法，该方法提取率高、操作过程简单、能耗低、成本低。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种制备印度苦木素类化合物的方法，其特征在于包括以下步骤：

以印度苦木茎为原料放入高速组织匀浆捣碎机中，在10000rpm条件下保持10min后，加入一定量的水，再加入0.5%的纤维素酶，在超声功率400-700W、35-40℃条件下酶解30min，再低温干燥，加入乙醇加热回流，合并回流液，滤过，取滤液，减压回收乙醇至尽，用正丁醇和水的混合溶液进行5-6级逆流萃取，合并萃取液，减压浓缩，加到氧化镁柱层析，正己烷-乙酸乙酯洗脱，收集含印度苦木素的洗脱液，减压回收试剂并干燥即得。

所述多级逆流萃取步骤中，正丁醇和水的体积比为10:1。

所述正己烷-乙酸乙酯洗脱，按正己烷-乙酸乙酯体积比5:1、3:1、1:1、1:3进行梯度洗脱。

本发明采用组织破碎、酶解和超声萃取处理物料，并利用多级逆流萃取和柱层析技术分离提取出印度苦木素类物质，具有提取率高、操作过程简单、能耗低、成本低等优点。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

取印度苦木茎2kg先切成小段，再放入高速组织匀浆捣碎机中，在10000rpm条件下保持10min后，加入6kg水，再加入0.5%纤维素酶，在超声功率500W、38℃条件下酶解30min，再在65℃干燥，加入8L60%乙醇加热回流提取1次，提取2h，收集提取液，过滤，滤液减压回收乙醇至尽，用体积比为10:1的正丁醇-水混合溶液进行5级逆流萃取，合并萃取液，减压回收试剂，将浓缩液加入氧化镁柱层析（浓缩液与氧化镁用量比为1:3），按正己烷-乙酸乙酯体积比5:1、3:1、1:1、1:3进行梯度洗脱，每个梯度用量400ml，收集合并印度苦木素流分，减压浓缩干燥、粉碎制得印度苦木素粉末。

实施例2：

取印度苦木茎2kg先切成小段，再放入高速组织匀浆捣碎机中，在10000rpm条件下保持10min后，加入6kg水，再加入0.5%纤维素酶，在超声功率700W、40℃条件下酶解30min，再在70℃干燥，加入10L70%乙醇加热回流提取3次，提取1.5h，收集提取液，过滤，滤液减压回收乙醇至尽，用体积比为10:1的正丁醇-水混合溶液进行6级逆流萃取，合并萃取液，减压回收试剂，将浓缩液加入氧化镁柱层析（浓缩液与氧化镁用量比为1:5），按正己烷-乙酸乙酯体积比5:1、3:1、1:1、1:3进行梯度洗脱，每个梯度用量400ml，收集合并印度苦木素流分，减压浓缩干燥、粉碎制得印度苦木素粉末。

实施例3：

取印度苦木茎2kg先切成小段，再放入高速组织匀浆捣碎机中，在10000rpm条件下保持10min后，加入10kg水，再加入0.5%纤维素酶，在超声功率400W、35℃条件下酶解30min，再在75℃干燥，加入6L65%乙醇加热回流提取2次，提取2h，收集提取液，过滤，滤液减压回收乙醇至尽，用体积比为10:1的正丁醇-水混合溶液进行5级逆流萃取，合并萃取液，减压回收试剂，将浓缩液加入氧化镁柱层析（浓缩液与氧化镁用量比为1:4），按正己烷-乙酸乙酯体积比5:1、3:1、1:1、1:3进行梯度洗脱，每个梯度用量400ml，收集合并印度苦木素流分，减压浓缩干燥、粉碎制得印度苦木素粉末。