[发明专利]军团菌DNA提取试剂盒及提取军团菌DNA的方法无效
| 申请号: | 201210349441.3 | 申请日: | 2012-09-18 |
| 公开(公告)号: | CN103509785A | 公开(公告)日: | 2014-01-15 |
| 发明(设计)人: | 朱庆义;胡朝晖;赵利伟 | 申请(专利权)人: | 上海金域医学检验所有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 200000 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 军团 dna 提取 试剂盒 方法 | ||
1.一种军团菌DNA提取试剂盒,包括DNA提取液,其特征在于:所述提取液由0.1~0.3%叠氮钠、5~10%Chelex-100溶液、8~12mM 三羟甲基氨甲烷盐酸、0.1~0.3mM乙二胺四乙酸二钠、100~200μg/ml蛋白酶K组成。
2.一种提取军团菌DNA的方法,其特征在于,包括以下步骤:
先配置200ml的DNA提取液:称取三羟甲基氨甲烷盐酸0.24g,加无菌水至100ml,混合溶解;再加浓盐酸10μl,调ph值至8.3;加乙二胺四乙酸二钠7.5mg混合溶解;再加叠氮钠0.2g,加无菌水至200ml;最后再加入10g的Chelex-100溶液和40mg的蛋白酶K,充分混合后,于-20℃保存。
再提取军团菌DNA:向浓缩处理的待提取样品中加入50~100μl的DNA提取液,充分混匀,置于55℃水浴30min,100℃水浴10min,置于13000rpm离心3min,取上清即为提取的军团菌基因组DNA。
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