[发明专利]海水环境中氯氰菊酯降解菌及其分离纯化和应用有效
| 申请号: | 201210345258.6 | 申请日: | 2012-09-18 |
| 公开(公告)号: | CN102899269A | 公开(公告)日: | 2013-01-30 |
| 发明(设计)人: | 刘菁华;史西志;孙爱丽;李德祥;周磊;陈炯 | 申请(专利权)人: | 宁波大学 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C02F3/34;B09C1/10;A62D3/02;C12R1/01;C02F101/38;A62D101/04;A62D101/28 |
| 代理公司: | 宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 | 代理人: | 程晓明 |
| 地址: | 315211 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 海水 环境 中氯氰菊酯 降解 及其 分离 纯化 应用 | ||
1.一种海水环境中氯氰菊酯降解菌,其特征在于:该菌为HS-12菌株,分类命名为海环站菌属(Mesonia sp.),于2012年4月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.6045,该菌株的16S rRNA的Genbank登陆号为JX087927。
2.根据权利要求1所述的海水环境中氯氰菊酯降解菌,其特征在于该菌株的生物学特征如下:革兰氏阴性,为杆菌,β-半乳糖甙酶、精氨酸双水解试验、柠檬酸盐试验、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧试验、V-P反应、明胶液化试验阳性,尿素酶试验、H2S反应、色氨酸脱羧酶、吲哚酶试验阴性,不可以利用蔗糖。
3.根据权利要求1所述的海水环境中氯氰菊酯降解菌,其特征在于:该菌株海水中生长,最适生长温度25-30℃,最适生长pH为7.0-7.8,在固体培养基上,菌落圆形、较薄,呈白色,半透明。
4.一种根据权利要求1所述的海水环境中氯氰菊酯降解菌的分离纯化方法,其特征在于具体包括如下步骤:
(1)培养基配制
将氯氰菊酯溶液加入到营养培养基中,使氯氰菊酯终浓度为100 mg/L,得到富集培养液;
(2)降解菌分离纯化
取500 mL海水样品于无菌状态下过滤富集后,加入到富集培养液中,在温度28℃、转速180 rpm的条件下,培养7 d,重复上述操作过程3次,每次培养的接种物均取自前次所得培养液,将最后一次培养所得的培养液稀释8-10倍后,取100μL涂布于含100mg/L氯氰菊酯的固体平板上,28℃恒温培养箱中培养,直至菌落单一,将纯化后的各菌落分别接至富集培养液中振荡培养,在温度28℃、转速180 rpm的条件下,培养7 d,通过气相色谱-电子捕获器检测各富集培养液中拟除虫菊酯类农药残留量,最后筛选获得一株对氯氰菊酯农药具有高效降解能力的菌株,即氯氰菊酯降解菌HS-12菌株。
5.根据权利要求4所述的海水环境中氯氰菊酯降解菌的分离纯化方法,其特征在于所述的营养培养基配制方法如下:精确称取磷酸高铁0.01 g、蛋白胨5.0 g、酵母膏1.0 g,加入过滤海水1000 mL,混合均匀后,调节pH为7.0-7.8,于121℃高压蒸汽灭菌20 min后制得。
6.一种根据权利要求1所述的海水环境中氯氰菊酯降解菌的应用,其特征在于:该菌株对氯氰菊酯具有较高的生物降解能力,可用于氯氰菊酯农药污染的海水及沉积物环境的生物修复。
7.一种根据权利要求6所述的海水环境中氯氰菊酯降解菌的应用,其特征在于:该菌株在温度25-30℃、pH 7.0-7.8、氯氰菊酯农药浓度100 mg/L的条件下,7 d后对海水中氯氰菊酯的降解率达到90 %以上。
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