[发明专利]人参寡糖提取物制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明属生物技术领域，具体地说是人参寡糖提取物制备方法以及在制备改善记忆力、抑菌药物及提高免疫能力的应用。 

背景技术

人参根是我国的传统中草药，是五加科植物人参（Panax ginseng.C.A Meyer）的根，在古代我国人民就已经将其作为名贵药材。人参根的活性成分分为皂苷类和非皂苷类。人参中的非皂苷活性成分主要有人参多糖，人参多肽，人参寡糖以及氨基酸，脂肪酸等。 

研究发现人参皂苷对II型糖尿病患者显示出的降血糖作用机制,对性功能障碍的治疗及NO的作用机制;对改善心血管系统的作用。人参还具有抗肿瘤作用，起主要作用的是人参多糖和人参皂苷。人参多糖的抗肿瘤作用可能是通过调节机体免疫功能实现的。人参皂苷的抗肿瘤作用及机制较为广泛，其抗肿瘤机制可能是增强机体免疫力，抑制或杀伤肿瘤细胞。其抗肿瘤作用的最大优势是毒副作用很小。人参总皂苷在体外对胰脂肪酶活性都有抑制作用。分离纯化的人参皂苷Rb2对牛主动脉内皮细胞（BAEC）纤维蛋白溶酶活性的作用。 

长期以来，对人参皂苷，人参多糖的研究是对人参活性成分研究的重点，而人参寡糖的研究则较为少见。 

发明内容

本发明的目的是为了提高人参的经济价值，而提供一种同时提取人参皂苷、多糖和寡糖的人参寡糖提取物制备方法。 

人参寡糖提取物制备方法，它包括： 

1）取烘干后的人参根，采用中药粉碎机粉碎，加入5倍体积的蒸馏水，浸泡过夜；

2）利用超声波清洗仪，超声处理10 -20min，再在60-80℃下煎煮3次，每次5 h，每次煎煮后用6层纱布过滤，最后合并，采用旋转蒸发仪，将合并的煎煮液浓缩至5 mL/g药材的体积；

3）将上述浓缩液装入非极性大孔树脂柱，以浓缩液相同体积的蒸馏水进行洗脱，洗脱至薄层层析法检测不显色；大孔树脂柱随后以乙醇进行洗脱，至薄层层析法不显色，合并乙醇洗脱液；

4）以恒温水浴锅蒸干乙醇洗脱液，以1mL/g药材体积水复溶，并在以等体积乙酸乙酯除杂3次，再以等体积水饱和正丁醇除杂三次，然后放入恒温水浴锅中在80℃下蒸干溶液，以1mL/g药材体积水复溶，-50℃冷冻干燥48h，得人参皂苷，收率为7%；

5）合并水洗脱液，再加入95%乙醇，边加入边搅拌，同时用酒精计测定溶液乙醇浓度，当浓度达到70%时，停止加醇，静置15-25 min，以4500 r/min离心8 -25min，使沉淀与上清分离；收集沉淀，挥发乙醇至无醇味，在-50℃条件下进行冷冻干燥，得人参多糖；

6）采用旋转蒸发仪对水洗脱液上清液浓缩至4-5mL/g药材的体积，将浓缩的液体装入中空纤维素柱进行分子量分级，取10000分子量以下的洗脱液再进行浓缩，最后在-50℃条件下真空冷冻干燥36 h，即制得人参寡糖粉末；所

    优选为：步骤2）所述的超生处理时间为10min，煎煮温度为80℃；步骤5）乙醇浓度达到70%时，停止加醇，静置15 min； 

优选为：步骤2）所述的超生处理时间为15min，超声频率40 KHz，超声功率100 W，煎煮温度为60℃；步骤5）乙醇浓度达到80%时，停止加醇，静置20 min；步骤6）所述的上清液浓缩至4mL/g药材的体积；

优选为：步骤2）所述的超生处理时间为20min，煎煮温度为70℃；步骤5）乙醇浓度达到70%时，停止加醇，静置25 min。

本发明的又一个目的是，人参寡糖提取物在制备改善记忆力、抗菌药物及提高免疫能力的药物的应用。 

    本发明另一个目的是提供一种提高免疫力的药物，它包括重量比为人参寡糖提取物0.5份和人参皂苷1份。 

本发明提供的人参寡糖提取物制备方法，先提取人参皂苷，再提取人参多糖，然后再提取人参寡糖，充分利用人参资源，提高了人参的价值，采用本发明方法，人参皂苷的平均收率7.1%，最高可达7.2%；人参多糖平均收率16.3%，最高可达17.5%，人参寡糖的平均收率19.53%，最高可达20.3%。经实验证明提取的人参寡糖有提高记忆力、抑菌及提高免疫力的作用。 

具体实施方式：

    实施例1  人参寡糖的制备方法

1）取烘干后的人参根500 g，采用中药粉碎机（电机转速1500r/min，功率1 kw）粉碎30s，加入5倍体积的蒸馏水，浸泡过夜。