[发明专利]胖大海药材指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱

说明书

发明领域

本发明涉及胖大海药材的高效液相色谱指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱的确定。

背景技术

胖大海是梧桐科苹婆属植物灯籽苹婆Sterculia lychnophora Hance的干燥成熟种子。其主产地位于泰国、越南、印度和马来西亚等热带地区。我国使用的胖大海大部分从这些国家进口。胖大海的主要药理作用为抗炎、抗病毒、抗菌等(杜力军，等.中药材，1995，18(8)：409-410；曲本钦，等.中华医学杂志，1954，(5)：337-340；Feng，DR，et al.J Chin Med，1942，61A：9-11)。目前报道的胖大海中的化学成分主要包括糖类、黄酮类、生物碱类和脂肪酸类(陈建民，等.中药材，1995，18(11)：567-569；陈建民，等.中国中药杂志，1996，21(1)：39-41；Wang RF，et al.Phytochemistry，2003，63(4)：475-478)。胖大海中的糖类由单糖、寡糖和多糖组成，例如鼠李糖、阿拉伯糖、蔗糖、半乳糖、半乳糖乙酸、半乳糖醛酸、正丁基甘露糖苷、水溶性多糖P I、PII、PPIII、碱溶性多糖PH、西黄芪粘胶素等。黄酮类主要有槲皮素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、山柰酚-3-O-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、异鼠李素-3-O-芸香糖苷等。生物碱类仅有苹婆碱I和苹婆碱II报道。另外还包含有机酸类如咖啡酸和2，4-二羟基苯甲酸等。但是，迄今为止还没有关于胖大海的指纹图谱的报道。指纹图谱可以从整体上反映中药所含化学成分的种类及含量多少，目前已经成为公认的评价中药质量和鉴别中药品种的有效手段之一。因此，构建胖大海的指纹图谱并确定其标准指纹图谱，对胖大海的质量评价和真伪鉴别具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的为提供一种构建胖大海药材指纹图谱的方法，以及通过该方法得到的胖大海药材的标准指纹图谱。其特征为：用20倍量(重量：体积)的70％乙醇在25℃超声提取胖大海药材粉末50min，将提取液过滤后进行高效液相色谱分析。分析的色谱条件为：Kromasil-C₁₈(250mm×4.6mm，5μm)色谱柱，带预柱；流动相为乙腈-0.5％醋酸水溶液；流速为0.74mL/min；检测波长为220nm；柱温30℃；梯度洗脱程序为：0min(5％乙腈)→30min(21％乙腈)→33min(33％乙腈)→36min(5％乙腈)→41min(5％乙腈)。在上述条件下测定购自中国各地的10批胖大海药材，得到其指纹图谱。通过分析这些胖大海药材的指纹图谱，确定了其中20个色谱峰为共有的特征峰(其中包括2，4-二羟基苯甲酸和尿嘧啶的色谱峰)，得到胖大海药材的标准指纹图谱(图1)。20个共有特征峰保留时间分别为3.928min、8.030min、14.079min、15.610min、17.025min、18.783min、20.383min、22.672min、23.088min、25.828min、27.838min、29.154min、30.610min、32.066min、32.421min、32.962min、33.673min、35.409min、35.978min、36.885min。

附图说明

图1胖大海药材的标准指纹图谱。

参见图1，通过对10批胖大海药材的指纹图谱进行分析得到的标准指纹图谱包括20个共有特征峰，其中7号峰为2，4-二羟基苯甲酸，19号峰为尿嘧啶。

具体实施方式

下面结合具体实施例，对本发明作进一步说明。

实施例

1.提取溶剂考察

精密称取胖大海粉末4份，每份1.000g，置具塞锥形瓶中。加入20倍量(重量：体积)的纯水、40％乙醇、70％乙醇、100％乙醇，称重。在25℃超声提取50min。放冷，称重并补足减失的重量。过滤，取续滤液以0.45μm微孔滤膜滤过，进样液相色谱仪。经过综合比较色谱峰数目和峰面积，确定70％乙醇为最佳提取溶剂。

2.色谱条件考察

对不同的色谱柱、流动相、流速和检测波长进行了考察，最终确定色谱条件为：Kromasil-C₁₈(250mm×4.6mm，5μm)色谱柱，带预柱；流动相为乙腈-0.5％醋酸水溶液；流速为0.74mL·min^-1；检测波长为220nm；柱温30℃；梯度洗脱程序为：0min(5％乙腈)→30min(21％乙腈)→33min(33％乙腈)→36min(5％乙腈)→41min(5％乙腈)。