[发明专利]一种用液相色谱法分离测定依折麦布原料及其制剂的方法

说明书

1.技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种用液相色谱法分离测定依折麦布及其有关物质的方法。

2.背景技术

依折麦布是治疗原发性高胆固醇血症的药物，作为饮食控制以为的辅助治疗，可单独或与HMG-CoA还原酶抑制剂联合应用于治疗原发性高胆固醇血症，可降低总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白。依折麦布化学名为1-(4-Fluoro-phenyl)-3-[3-(4-fluoro-phenyl)-3-hydroxy-propyl]-4-(4-hydroxy-phenyl)-azetidin-2-one，分子式为C₂₄H2₁F2NO₃。依折麦布结构式为：

在合成该化合物的过程中，有几步重要的中间体可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，这几个中间体即药物质量控制中的有关物质，对于依折麦布的合成主要控制的有关物质有三个，分别是中间体1(3-[2-(4-Benzyloxy-phenyl)-1-(4-fluoro-phenyl)-4-oxo-azetidin-3-yl]-propionic acid)、中间体2(4-(4-Benzyloxy-phenyl)-1-(4-fluoro-phenyl)-3-[3-(4-fluoro-phenyl)-3-oxo-prolyl]-azetidin-2-one)、中间体3(4-(4-Benzyloxy-phenyl)-1-(4-fluoro-phenyl)-3-[3-(4-fluoro-phenyl)-3-hydroxy-propyl]-azetidin-2-one)，结构式分别为：

对于合成依折麦布中引入的有关物质，不论是在原料药还是制剂中都是需要进行质量控制的，因此，实现依折麦布及其有关物质的分离，在依折麦布的合成和制剂过程的质量控制方面具有重要的现实意义。

3.发明内容

本发明的目的在于提供一种分析依折麦布的纯度以及分离其有关物质的方法，从而实现依折麦布与其有关物质的分离和测定，保证依折麦布及含依折麦布制剂的质量控制。

本发明所述的用液相色谱法分析依折麦布的纯度以及分离其有关物质的方法，是采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的酸水溶液-有机相为流动相。

上述所说的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，选自Kromasil-C₁₈。

上述所说的有机相选自以下溶剂中的一种：甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇，优选为甲醇或乙腈。

上述所说的方法，其流动相酸水溶液-有机相采用梯度洗脱。

上述所说的方法中，酸水溶液中包含的酸选自磷酸、碳酸、甲酸、乙酸中的一种，优选为磷酸。

其中酸水溶液中包含的酸的浓度为0.01～0.5％，优选浓度为0.1％。

本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：

1)取依折麦布或含依折麦布的制剂样品适量，用甲醇或流动相溶解样品，配制成含依折麦布0.1～1.5mg的样品溶液。

2)设置流动相流速为0.5～1.5mL/min，流动相流速优选为1.0mL/min，检测波长为210～250nm，最佳检测波长为240nm，色谱柱柱箱温度为20～40℃，柱箱柱温最佳为30℃。

3)取1)的样品溶液10～50μL，注入液相色谱仪，完成依折麦布与有关物质的分离测定。其中：

高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津岛津：

LC-10ATvp，SPD-M10Avp

色谱柱：C₁₈(Merck，250×4.6mm，5μm)

流动相：A：0.1％磷酸水溶液；B：乙腈，按以下梯度进行洗脱

流速：1.0mL/min

检测波长：240nm

柱温：30℃

进样体积：10μL

本发明采用C₁₈(Merck，250×4.6mm，5μm)，能够有效的分离依折麦布及其有关物质。本发明解决了依折麦布及其有关物质的分离测定问题，从而确保了依折麦布及其制剂的质量可控。

4.附图说明

图1空白溶剂的高效液相色谱图

图2依折麦布及其有关物质的高效液相色谱图

图3依折麦布原料的高效液相色谱图

图4依折麦布片辅料空白的高效液相色谱图

图5依折麦布片的高效液相色谱图

5.具体实施方式：