[发明专利]棉铃虫和烟夜蛾的NPY神经肽及其编码基因和应用有效
申请号: | 201210336811.X | 申请日: | 2012-09-12 |
公开(公告)号: | CN103665132A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
发明(设计)人: | 赵章武;刘晓光;周子敬 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C12N15/12;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N15/113;A01H5/00;A01N61/00;A01P7/04 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 棉铃虫 夜蛾 npy 神经肽 及其 编码 基因 应用 | ||
技术领域
本发明涉及一种棉铃虫和烟夜蛾的NPY神经肽及其编码基因和应用。
背景技术
神经肽NPY(Neuropeptide Y)首先在高等动物中发现,之后相继在无脊椎动物中发现,在昆虫中的发现相对较晚。由于最早发现的Neuropeptide Y成熟肽C-末端为酪氨酸(Y)而被命名NPY,无脊椎动物中以苯丙氨酸(F)结尾,所以将无脊椎动物此类神经肽统称为NPF,或无脊椎动物的NPY家族。目前在昆虫中NPY命名尚未统一,以酪氨酸结尾的称NPY(如意大利蜜蜂),以苯丙氨酸结尾的称NPF(如果蝇),昆虫NPF或者NPY总称NPY类神经肽。目前,昆虫其他目的物种中,仅发现有NPF或者NPY,而在鳞翅目昆虫中发现同时含有NPF和NPY。该类基因主要分布于脑和中肠中,在取食、酒精过敏、能量平衡、性行为、焦虑、学习和记忆、生物节律等许多方面都起着重要的调控作用。
目前,在无脊椎动物中,对NPY基因功能的研究相对滞后,主要集中在果蝇和线虫的NPF上。在鳞翅目昆虫中,该基因还未见报道。研究棉铃虫NPY的基因及其功能,对于害虫防治新技术的开发具有广泛的前景。
烟夜蛾和棉铃虫都属于鳞翅目、夜蛾科,主要以幼虫取食幼嫩组织为害作物,以蛹越冬。烟夜蛾在全国各地均有分布,属寡食性害虫,主要为害烟草。棉铃虫是一种在全球范围内为害农作物的害虫,食性广,为害严重。另外,棉铃虫具有显著的生理生态及行为特点,例如杂食性、滞育、迁飞等,还是研究鳞翅目昆虫的代表物种。
发明内容
本发明的目的是提供一种棉铃虫和烟夜蛾的NPY神经肽及其编码基因和应用。
本发明提供的蛋白质,来自棉铃虫或烟夜蛾,命名为NPY蛋白,是如下(a)或(b):
(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与昆虫进食量相关的由序列1衍生的蛋白质。
编码所述蛋白的基因(NPY基因)也属于本发明的保护范围。
所述基因可为如下1)至6)中任一所述的DNA分子:
1)序列表的序列2自5’末端第24-305位核苷酸所示的DNA分子;
2)序列表的序列3自5’末端第24-305位核苷酸所示的DNA分子;
3)序列表的序列2所示的DNA分子;
4)序列表的序列3所示的DNA分子;
5)在严格条件下与1)或2)或3)或4)限定的DNA序列杂交且与昆虫进食量相关蛋白的DNA分子;
6)与1)或2)或3)或4)限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码与昆虫进食量相关蛋白的DNA分子。
含有所述NPY基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌均属于本发明的保护范围。
本发明还保护抑制所述NPY基因表达的物质在如下(c)或(d)中的应用:(c)培育抗虫转基因植物;(d)制备抗虫剂。所述植物为单子叶植物或双子叶植物。所述双子叶植物具体可为烟草,如烟草NC98。所述抗虫具体可为抗鳞翅目昆虫,更具体可为抗夜蛾科昆虫,进一步具体可为抗棉铃虫或抗烟夜蛾。
本发明还保护一种培育转基因植物的方法,包括如下步骤:将抑制所述NPY基因表达的物质导入出发植物,得到对昆虫抗性增强的转基因植物。所述出发植物为单子叶植物或双子叶植物。所述双子叶植物具体可为烟草,如烟草NC98。所述昆虫具体可为鳞翅目昆虫,更具体可为夜蛾科昆虫,进一步具体可为棉铃虫或烟夜蛾。
本发明还保护一种抗虫剂,它的活性成分为抑制所述NPY基因表达的物质。所述抗虫具体可为抗鳞翅目昆虫,更具体可为抗夜蛾科昆虫,进一步具体可为抗棉铃虫或抗烟夜蛾。
以上任一所述抑制NPY基因表达的物质可为针对所述NPY基因的干扰载体或抑制所述NPY基因表达的双链RNA。
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