[发明专利]一种疏水性多肽修饰抗体的合成方法在审
| 申请号: | 201210333076.7 | 申请日: | 2012-09-11 |
| 公开(公告)号: | CN103665095A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
| 发明(设计)人: | 高志贤;周焕英;刘忠文;张亦红;刘飞;陈风春;刘芳;苏璇 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院卫生学环境医学研究所 |
| 主分类号: | C07K1/107 | 分类号: | C07K1/107 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 300050*** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 疏水 多肽 修饰 抗体 合成 方法 | ||
1.一种疏水性多肽修饰抗体的合成方法,具体涉及一种采用疏水性多肽RRRRRRRR或AC-FAAAVLAAPIL修饰雌二醇抗体的合成方法,其特征在于包括以下合成步骤:
(1)配制20-150mg/mL的疏水性多肽溶液,溶剂为10-30%的甲醇。
(2)按照多肽:NHS:EDC摩尔质量为1∶2∶2-5的比例向多肽溶液中依次加入N-羟基丁二酰亚胺(NHS)和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl),充分溶解后,800-1000转/分钟避光震荡反应15-30分钟,得到活化后的多肽溶液。
(3)按照活化后的多肽和抗体30-40∶1的摩尔质量比,将活化后的多肽溶液逐滴加于3-6倍体积的抗体磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,4℃避光反应8-12小时。
(4)超滤离心去处未结合的多肽。
(5)将超滤管中剩余液体用适量的PBS重新定容,从超滤管吸出,冰箱4℃保存备用。
2.根据权利要求1所述的合成方法,如上所述的多肽为RRRRRRRR或AC-FAAAVLAAPIL。
3.根据权利要求1所述的合成方法,如上所述的抗体为水溶性抗体。
4.根据权利要求1所述的合成方法,如上所述的磷酸盐缓冲溶液pH6.5-7.5,浓度为0.01mol/L。
5.根据权利要求1所述的合成方法,所述超滤离心使用离心管所用膜:5000-20000MWCO PES。
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