[发明专利]一种用于组织细胞基因组DNA的核酸吸附快速分离方法无效
申请号: | 201210332754.8 | 申请日: | 2012-09-11 |
公开(公告)号: | CN102864139A | 公开(公告)日: | 2013-01-09 |
发明(设计)人: | 饶国洲;李昂;苟建重;石建峰;魏红 | 申请(专利权)人: | 西安交通大学口腔医院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C07H21/04;C07H1/08 |
代理公司: | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人: | 李郑建 |
地址: | 710004 陕西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 组织细胞 基因组 dna 核酸 吸附 快速 分离 方法 | ||
1.一种用于组织细胞基因组DNA的核酸快速分离方法,其特征在于,该方法采用核酸吸附离心套管,用DNA提取试剂从匀浆后的组织或消化后的细胞中快速分离DNA,所述的DNA提取试剂由悬浮溶液、离解溶液、清除溶液、洗涤溶液、分离溶液组成,具体操作过程是:
收集经匀浆后的组织或消化后的细胞,加悬浮溶液悬浮,然后用离解溶液将基因组DNA从组织或细胞中离解出来,通过核酸吸附管中吸附层的吸附,用清除溶液清除蛋白质及其他杂质,再用洗涤溶液清洗,最后用分离溶液使DNA与核酸吸附层脱离,从而获得超纯的DNA;
所述的DNA提取试剂各组分及物质浓度(摩尔/升)组成按终浓度体积为:
悬浮溶液:0.01-0.2mol/L C4H11NO3,0.001-0.5mol/L EDTA,0.0001-0.9mol/L C15H28NaNO3,余量为去离子水;
离解溶液:0.5-10mol/L胍盐,余量为去离子水;
清除溶液:0.1-10mol/L胍盐,0.01-4mol/L C4H11NO3,余量为乙醇和去离子水的混合溶液;
洗涤溶液:0.01-8mol/L NaCl,0.001-3mol/L C4H11NO3,余量为乙醇和去离子水的混合溶液;
分离溶液:0.01-10mol/L EDTA,0.001-0.6mol/L C4H11NO3,余量为去离子水。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述核酸吸附离心套管包括内层吸附管和外层收集管,其中,内层吸附管中含吸附介质层,外层套管为液体收集管,使用时将内层吸附管插入到外层收集管中。
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