[发明专利]一种高赖氨酸发酵脱毒棉粕的制备方法

权利要求书

1.一种高赖氨酸发酵脱毒棉粕的制备方法，其特征在于，依次包括下述步骤：

1）菌种的活化：

a、将热带假丝酵母菌、产朊假丝酵母菌和酿酒酵母分别接种至酵母菌培养基，置于培养箱，30～37℃下，培养24～36 h，制得热带假丝酵母菌一级菌种、产朊假丝酵母菌一级菌种和酿酒酵母一级菌种；

b、将乳杆菌接种盛有液体乳杆菌培养基中，于30～37℃下，静置培养24～48 h，制得乳杆菌一级菌种；

2）生产用种的制备

a、将步骤1）中制备的制得热带假丝酵母菌一级菌种、产朊假丝酵母菌一级菌种和酿酒酵母一级菌种分别接种至固体培养基中，于30～37℃，培养48～72 h，制得热带假丝酵母菌二级菌种、产朊假丝酵母菌二级菌种、酿酒酵母菌二级菌种；

b、将步骤1）中制备的乳杆菌一级菌种接种乳杆菌液体培养基中，在30～37℃，静置培养48～72 h，制得的乳杆菌二级菌种；

3）发酵底物的制备

称取下述质量百分比的原料：棉粕60～80%、豆粕10～20%、玉米粉5～15%、糖蜜3～5%、磷酸二氢钾0.30～0.45%、碳酸钙0.3～0.45%、酸性木聚糖酶0.05～0.10%、植酸酶0.05～0.30%混合制得发酵底物；

4）发酵底物接种

将步骤2）中的制备的热带假丝酵母菌二级菌种、产朊假丝酵母菌二级菌种和酿酒酵母二级菌种以重量比为3:1:1混合均匀后，以2～5%的接种量接种至步骤3）所得的发酵底物中；乳杆菌二级菌种以0.4～1%的接种量接种至步骤3）所得的发酵底物中，调节含水量至45～60%，搅拌均匀，发酵2～6天后，干燥即得。

2.根据权利要求1所述的一种高赖氨酸发酵脱毒棉粕的制备方法，其特征在于，所述的酵母菌培养基中各成分的浓度为：蛋白胨4.5～5.5g/L，酵母膏12～15g/L，氯化钠3～5g/L，葡萄糖9～11g/L。

3.根据权利要求1所述的一种高赖氨酸发酵脱毒棉粕的制备方法，其特征在于，所述的酵母菌培养基pH为6.5～7.5。

4.根据权利要求1所述的一种高赖氨酸发酵脱毒棉粕的制备方法，其特征在于，所述的乳杆菌培养基中各成分的浓度为：蛋白胨3～5g/L，葡萄糖3～5 g/L，氯化钠2～3 g/L，磷酸二氢钾2～3 g/L，磷酸氢二钾2～3g/L，淀粉1.5～2 g/L，氯化镁0.2 g/L，硫酸钙0.05g/L。

5.根据权利要求1所述的一种高赖氨酸发酵脱毒棉粕的制备方法，其特征在于，所述的固体培养基干料由下述重量分的原料组成：豆粕55～70%，棉粕25～35%，玉米粉3～10%，糖蜜3～5%，硫酸镁0.03～0.05%；含水量为40～45%。

6.根据权利要求1所述的一种高赖氨酸发酵脱毒棉粕的制备方法，其特征在于，所述的酸性木聚糖酶的酶活力为50,000I U/g；所述的植酸酶活力为5,000IU/g 。