[发明专利]一种鱼腥草快速增殖的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养领域，具体涉及一种鱼腥草的快速增殖方法。

背景技术

鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb.)为三白草科蕺菜的嫩茎叶，因其茎叶搓碎后有鱼腥味，故名鱼腥草，又名蕺儿菜、折耳根等。我国从20世纪40年代初开始进行鱼腥草的人工栽培，但并没有形成规模，长期以来主要利用野生资源。鱼腥草素（癸酰乙醛）是鱼腥草挥发油中的主要药用成分，其对金黄色葡萄球菌等有明显抑制作用（熊大胜，鱼腥草提取抑菌作用研究，常德师范学院学报自然科学版,2002,14(4):59-60）。鱼腥草还含有槲皮甙等有效成分，具有抗病毒和利尿作用。临床实践表明：鱼腥草对于上呼吸道感染、支气管炎、肺炎、慢性气管炎等均有较好的疗效，尤其对治疗肺痈有特殊的疗效（陈建武，宋康，鱼腥草治疗肺系疾病概述，浙江中西医结合杂志,2010,20(11):713-714；可馨，治疗肺痈的良药，求医问药,2011,07:43-44）。另外，鱼腥草还能增强机体免疫功能，抗肿瘤、消炎（曹俊双,秦荣和，鱼腥草的药理作用及临床应用，现代中西医结合杂志,2001,10:572）等方面的作用。被国家卫生部正式确定为“既是药品，又是食品”的资源之一（国家药典委员会，中华人民共和国药典(一部)，北京:化学工业出版社,2001:606-607）。

鱼腥草的繁殖技术主要包括扦插繁殖(余启高等,鱼腥草优质高产栽培技术,安徽农学通报,2007,05:175)分株繁殖（王班琼，浅析鱼腥草的发展及栽培技术，农技服务,2007,24(4):102；刘国庆，鱼腥草栽培技术，现代园艺，2009,4:40-41；徐如意等，鱼腥草人工栽培技术，科技宝典，种植,2008,05:87-880）、根茎繁殖（黄吉美等,鱼腥草无公害丰产栽培技术，云南农业科技,2004,5:15-16；陈洪德等,鱼腥草的栽培管理与综合开发，福建茶叶,2001,01:23-24）、组织培养繁殖。近年来，生产中开始出现病害严重，种根使用混杂，鱼腥草的种根产量和质量难以保证等问题（高静等，鱼腥草的现代研究进展，湖南中医学院学报，2005，12（6）：60-62）。因此通过鱼腥草组织或器官的离体培养和形态发生（袁艺等，鱼腥草组织培养的研究，激光生物报，2004,13(6):214-21；龚伟等，鱼腥草组织培养，亚热带植物科学，2005,34(1):60-62），实现种苗的快速繁殖，解决因病害或有性繁殖系数低而影响产量和质量的问题，具有十分重要的生产意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种鱼腥草快速增殖的方法，采用鱼腥草增殖与生根同步的方法，以便快速、高效、大规模地生产纯正、健康、整齐一致的鱼腥草种苗。

本发明的目的是通过以下方式实现的。

一种鱼腥草快速增殖方法，包括以下步骤：

（1）外植体的取材与消毒：取当年生鱼腥草的地下茎节流水清洗4-6h后，切成带1-2个茎节的茎段，用链霉素和青霉素钠的混合液浸泡12h，混合液中链霉素和青霉素钠的浓度均为0.5g/L；然后用70%酒精浸泡30s；再用0.1%升汞消毒12min；后用无菌水冲洗4-5次；最后用0.1%升汞消毒灭菌10min，无菌水冲洗5次后备用；

（2）诱导培养：将消毒好的带1-2个茎节的茎段接种在MS+0.5mg/LNAA+2mg/L6-BA培养基上诱导不定芽产生，培养条件为25℃±1℃，光照强度为2000-3000lx，光照时间为16h/d，30d后得到1-3cm高的启动苗；

（3）增殖培养与生根：将启动苗切成单个茎段，接种在培养基MS+蔗糖30g/L+琼脂5g/L+GA₃4-5mg/L+0.2mg/L NAA上，培养条件为25℃±1℃，光照强度为2000-3000lx，光照时间为16h/d，30d后得到高6-8cm带5-6个茎节的生根的鱼腥草苗；

（4）炼苗与移栽：将步骤（3）得到的鱼腥草苗进行炼苗移栽。

该发明具有以下优点：（1）采用二步灭菌法比一步灭菌法的灭菌效果更好，对鱼腥草内生细菌的有较好的抑制作用。(2)利用地下茎节做外植体,能灭菌得比较彻底且能保证较高的存活率。采用地上茎节做外植体，如果剥落全部叶片，则容易导致幼嫩芽点被伤害和脱落，存活率不高；如果保留部分叶片，其托叶与叶柄合生成的鞘内部消毒不能彻底，灭菌过程中污染率特别高。（3）增殖和生根培养通过添加合适量的GA₃，能促进鱼腥草不定芽的伸长，繁殖系数高，且在增殖的同时诱导生根，缩短培育周期。（4）生根率和移栽成活率高，遗传稳定性好。