[发明专利]用于后巩膜加固术的异种巩膜片及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及组织工程学和材料学领域，具体地说，涉及用于后巩膜加固术的异种巩膜片及其制备方法。

背景技术

后巩膜加固手术是治疗进行性近视，高度近视安全有效的方法。在以往临床应用中，后巩膜加固手术所使用的材料，大多取自同种异体尸源身上的硬脑膜或巩膜，经过眼科医生的简单处理后即直接用于手术临床。然而，受到医师技能水平和医疗条件的制约，自制的后巩膜片质量标准不一，存在一定的手术风险，另外，如果尸源生前罹患某些重大疾病，则不适于作为供体。由于取材的限制使得后巩膜加固手术发展缓慢，无法大规模推广应用。

发明内容

本发明旨在克服现有技术中存在的缺陷，提供一种基材来源广泛，硬度和弹性适宜，易于植入且无排异反应的适用于后巩膜加固术的异种巩膜片。

本发明的另一目的是提供上述适用于后巩膜加固术的异种巩膜片的制备方法。

为了实现本发明目的，本发明的一种用于后巩膜加固术的异种巩膜片，所述异种巩膜片包括三种规格：第一种规格巩膜片呈长方形，长为18~22mm，宽为8~12mm（优选长×宽为20mm×10mm）；第二种规格巩膜片呈长方形，长为75~80mm，宽为8~12mm（优选10mm）；第三种规格巩膜片呈左右不对称的倒“凹”字形，且各边具有一定弧度，该倒“凹”字形巩膜片的长为24~26mm，宽为19~20mm；以上三种规格巩膜片的厚度均为0.6-1mm；巩膜片的基材来源于动物的心包膜或巩膜。所述动物为牛、猪或家兔等家畜。优选两年左右的健康家畜。

本发明还提供上述用于后巩膜加固术的异种巩膜片的制备方法，包括以下步骤：

1）基材选择：选取动物的心包膜或巩膜；

2）基材预处理：除去心包膜或巩膜上的多余组织（如脂肪组织），然后将基材浸泡于去污剂中去除杂质，制成毛材；

3）剪裁成形：根据需要，将毛材剪裁或切割成所需规格的后巩膜片形状；

4）脱细胞处理：分别用胰蛋白酶液和TritonX-100处理成形的毛材，以充分消化和裂解细胞，制成精材；

5）消毒杀菌：对精材进行化学或物理灭菌；

6）调pH值：用pH值7.2-7.4的PBS缓冲液清洗灭菌后的精材，即得成品。

前述方法中，步骤1）中所述动物为牛、猪或家兔等家畜。

前述方法中，步骤2）中所述去污剂为氯己定，浸泡时间为30-40min。主要目的是利用去污剂对细胞膜脂和脂蛋白的破坏作用，破坏细菌胞浆膜上的渗透屏障，导致部分胞浆渗漏，胞浆凝聚变性，起到杀菌消毒作用。

前述方法中，步骤4）中使用的胰蛋白酶液和TritonX-100的浓度分别为0.25%和2%。具体为：将成形的毛材浸泡于胰蛋白酶液中12h，然后转移至TritonX-100中振荡处理36h。经抑制剂胰蛋白酶的消化，使细胞膜上的蛋白变性，通过胰蛋白酶对细胞核的水解作用，有效地去除了组织中的细胞成分。采用中性去污剂TrtionX-100在恒温振荡器中裂解细胞，经过处理的毛材保持天然的结构，蛋白结构保持稳定状态，使经过裂解的细胞丧失活力。

前述方法中，步骤5）的灭菌方式优选为用戊二醛处理精材1h。戊二醛能与蛋白质发生反应，从而杀灭各种微生物。

前述方法中，步骤5）灭菌采用钴-60辐照灭菌。

前述方法中，还包括将巩膜片成品保存于75%的乙醇溶液中。

三种规格的异种后巩膜片使用说明如下：

1、第一种规格为四片包装的后巩膜片，主要适用于近视度在200~500度的轻度近视青少年患者。

2、第二种规格为一片包装的后巩膜片，主要适用于500~900度的高度近视患者。

3、第三种呈左右不对称的倒“凹”字形的后巩膜片，主要针对高度近视并发症患者。

采用去污剂联合酶脱细胞技术可以彻底脱去组织中的所有细胞、抗原、脂质、可溶性蛋白质等杂质，保留具有完整外观形态和组织学及超微结构的不溶性基质成分，主要包括胶原、弹性蛋白、蛋白多糖、糖胺多糖和非胶原糖蛋白等，除去了引起免疫反应的细胞成分，使基材只起到支架作用的载体。