[发明专利]一种建立2型糖尿病动物模型的方法及其在筛选降血糖药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备2型糖尿病动物模型的方法及其在糖尿病药物筛选中的应用，具体涉及一种用于分析2型糖尿病发病机理的动物模型制备方法及其在进行2型糖尿病相关药物筛选的动物模型中的应用。

背景技术

糖尿病，中医称之为消渴病，是由于体内胰岛素绝对或相对分泌不足而引起的以糖、脂肪、蛋白质等代谢紊乱为主的一种内分泌疾病，可累及全身各器官和组织，导致糖尿病并发症，是严重危害社会和人类健康的慢性疾病之一。

近年来糖尿病发病率呈上升趋势，据世界卫生组织统计，1998年糖尿病发病数达1.35亿，2000年达到1.6亿，到2004年达到2.4亿。据最近的流行病学调查显示，我国的糖尿病发病率已由15年前的0.67%上升到近年来的3.2%，其中非胰岛素依赖型的2型糖尿病患者占总数的90%以上。

现有的降血糖研究包括分子水平，细胞水平，活体水平；其中以活体研究意义最大。活体动物模型主要包括：自发型糖尿病动物模型，比如ob/ob小鼠；化学药物引起的糖尿病动物模型，比如链脲佐菌素引起的小鼠或大鼠糖尿病模型，这些动物模型都是模拟人类糖尿病的特征。另外，还有高脂高糖联合化学药物建立糖尿病动物模型。

有研究表明二型糖尿病与饮食和饮酒有重要的关联，上述模型中不能反应出饮食和酒精对2型糖尿病致病的影响。

曾有报道做过高脂高糖和酒精联合建造2型糖尿病动物模型，由于其高脂高糖配方存在缺陷，缺少胆酸钠（促进鼠类动物胆固醇和脂肪吸收），导致动物模型中部分指标无统计学意义，建模未成功。

发明内容

本发明的目的是提供一种构建2型糖尿病动物模型的方法，该方法模拟人类2型糖尿病的发病过程，所制备的动物模型出现高空腹血糖、高胰岛素血症、高血脂、糖耐量减低等2型糖尿病的典型特征，适合于2型糖尿病激励研究和进行大量的药物筛选。

本发明方法的特征在于高脂高糖饲料喂养动物一段时间，同时给动物灌服一定浓度酒精，使动物血糖升高、血脂升高，发生胰岛素血症及胰岛素抵抗。

本发明方法包括以下步骤：

通过自由摄食，用高脂高糖饲料持续喂养模型动物2-10周，同时灌胃体积分数10%-60%的食用酒精1-20毫升/千克。

本发明方法中，高脂高糖饲料由基础饲料、蔗糖、油脂、胆固醇、胆酸钠、蛋黄粉组成。其中，油脂可以为猪油，或者牛油。

高脂高糖饲料的比例为基础饲料50%-70%；蔗糖10%-20%；油脂10%-20%；胆固醇1%-5%；胆酸钠0.5%-2%；蛋黄粉5%-10%。

模型动物包括野生型小鼠，如C57BL/6J小鼠，BALB/c小鼠，ICR小鼠，KM小鼠；野生型大鼠，如Wistar大鼠，SD大鼠等。

模型动物在喂养4至20周后，白天空腹，即早上6：00开始断食不断水，晚上18：00处死取血，自动生化分析仪检测血液中各项指标，如血糖，胰岛素，血脂，胆固醇，低密度脂蛋白，高密度脂蛋白。

附图说明

图1为大鼠OGTT试验结果，●表示实验组数据，▲表示正常组实验数据，*表示与正常组对比，P<0.05。

具体实施方式

1、小鼠试验：

C57BL小鼠，30只，随机分为两组，各15只。正常组，喂养正常饲料，自由进食饮水；试验组，喂养高脂高糖饲料，自由饮水，每天灌胃0.2 ml 30%食用酒精。

高脂高糖饲料的比例为基础饲料60%；蔗糖15%；油脂15%；胆固醇3%；胆酸钠0.5%；蛋黄粉6.5%。

饲养8周后，白天空腹，即早上6:00空腹，晚上18点断头取血，分离血清，自动生化分析仪检测血液中各项指标。统计学软件分析数据显著性。

结果如表1所示，与正常组对比，试验组小鼠的空腹血糖、胰岛素、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白显著增加，高密度脂蛋白显著降低，与人类2型糖尿病患者的血液指标趋势一致，建模成功。

 

表1 小鼠建模结果