[发明专利]转录因子NFATC3作为药物靶点在逆转肿瘤多药耐药中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及转录因子NFATC3的一种新用途，尤其涉及转录因子NFATC3作为药物靶点在逆转肿瘤多药耐药中的应用。

背景技术

肿瘤是严重危害人类健康的一类疾病，位居各类死因之首。目前我国患肿瘤人数众多，每年死于肿瘤的人数超过160万。在我国现已批准上市的抗肿瘤药物大约有200多种，但随着肿瘤化疗药物的广泛应用，肿瘤的多药耐药问题凸显，已成为肿瘤化疗失败最常见而又难以解决的问题之一，据统计90%以上的肿瘤患者死于不同程度的耐药。

肿瘤多药耐药（multidrug resistance，MDR）是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生抗药性的同时，对结构和作用机制不同的抗肿瘤药物产生交叉耐药性，从而大大降低抗肿瘤药物的疗效。因此，研究MDR的产生机制，寻求有效的耐药逆转措施从而克服MDR现象已成为国内外的研究热点。跨膜蛋白介导的MDR为最经典的MDR产生机制，其中最常见的为P-糖蛋白。P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）也称p170糖蛋白，是由多药耐药基因MDR1所编码的一种ATP依赖性膜转运蛋白，P-gp为一种药物泵，能将多种药物泵出细胞外，使胞内药物聚积减少，从而减弱药物的细胞毒作用，最终使肿瘤细胞产生耐药性。P-gp主要介导亲脂性抗肿瘤药物引起的MDR，包括抗生素类如多柔比星/阿霉素（ADM）、丝裂霉素（MMC）,植物类药物如长春新碱（VCR）、依托泊苷（Vp216）等。根据MDR产生机制，选择特有的靶点设计合成直接作用于耐药肿瘤的新药进行靶向治疗，将对肿瘤的治疗非常有益。

近几年，研究者发现了很多与肿瘤多药耐药相关的药物靶点，然而依据这些这些药物靶点研发或筛选出的耐药逆转剂通常具有严重的毒副作用，因而阻碍了它们在临床上的应用，因此，寻找新的肿瘤耐药相关靶点，并在此基础上设计筛选出高效低毒的多药耐药逆转剂亟不可待。

NFAT（nuclear factor of activated T cells）即活化T细胞核因子，属于一类转录因子家族，在免疫反应中对诱导基因转录起重要作用。NFAT分为NFATC1-NFATC4 四种亚型。NFAT在各种类型的免疫细胞（如B细胞、NK细胞、肥大细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞）以及肿瘤和构成肿瘤微环境的细胞内均有表达，其活性受到钙离子依赖性的钙调蛋白磷酸酯酶（Calcineurin）的调节，其活化过程分为三步：脱磷酸、核易位、对DNA亲和力的提高。在静止细胞中，NFAT蛋白被磷酸化而存在于细胞浆，对DNA具有低亲和力，在由任何因素引起的细胞外钙内流的情况下（如由瞬时受体电位通道TRPC5介导的细胞外钙内流），上述钙离子依赖性钙调蛋白磷酸酯酶将促使 NFAT蛋白快速脱磷酸化并进入细胞核，入核后的NFAT对DNA的亲和力增强。NFAT抑制剂如他克莫司（FK-506）、环孢菌素A（CyclosporinA）、VIVIT等可通过抑制上述钙调蛋白磷酸酯酶来阻断NFAT通路。

目前，国内外未见有转录因子NFAT作为药物靶点在逆转肿瘤多药耐药中的应用。

发明内容

针对现有技术存在的上述缺陷，本发明的目的在于提供转录因子NFATC3的一种新用途，即：转录因子NFATC3作为药物靶点在逆转肿瘤多药耐药中的应用。

所述药物为NFATC3抑制剂，包括他克莫司、环孢菌素A或VIVIT。

所述肿瘤多药耐药是由P-gp介导产生。

本发明的有益技术效果为：

经本发明人研究发现，与敏感型肿瘤细胞（如MCF-7/WT）相比，介导肿瘤产生多药耐药的P-gp蛋白在多药耐药肿瘤细胞（如MCF-7/ADM）中有更高水平的表达，此外，预测并证实了转录因子NFATC3可与MDR1启动子区域相结合，在瞬时受体电位通道TRPC5介导的细胞外钙内流的激活作用下，转录因子NFATC3的转录活性增强从而上调p-gp的表达水平，证明该转录因子与肿瘤多药耐药密切相关；实验结果表明，NFATC3抑制剂（FK-506、CyclosporinA、VIVIT）对肿瘤细胞的多药耐药具有明显的逆转作用，且上述抑制剂本身在使用剂量范围内毒副作用很小；因此，本发明为抗肿瘤多药耐药新药的设计提供了新的靶点，为肿瘤多药耐药的逆转提供了新的思路。

附图说明

图1为转录因子NFATC3的活化及活化后的NFATC3上调MDR1基因表达的过程示意图。

图2为本发明实施例1中多药耐药肿瘤细胞中MDR1 mRNA 转录水平的检测结果示意图。