[发明专利]斑蝥类毒素的制备方法无效
申请号: | 201210315863.9 | 申请日: | 2012-08-31 |
公开(公告)号: | CN102796794A | 公开(公告)日: | 2012-11-28 |
发明(设计)人: | 徐华民;赵荣华;赵艳琨;徐萌 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨工业大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/16;C07K1/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 150000 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 斑蝥 类毒素 制备 方法 | ||
1.斑蝥类毒素的制备方法,其特征在于所述制备方法如下:
(1)以斑蝥为原料,经粉碎处理后加入蛋白酶进行酶解反应;
(2)用分离机以3000-15000r/min分离上述酶解液;
(3)收集液体进行脱毒处理,成为斑蝥类毒素粗品液相,控制pH=5.8-8.0,温度25-45℃;
(4)斑蝥类毒素粗品液相采用化学法或物理法进行灭活处理;
(5)用膜孔径0.2-5μm微孔过滤机过滤,并且用膜孔径10-100nm超滤机超滤处理,收集超滤液;
(6)超滤液溶于溶剂体系中,泵入超声驻波液相制备色谱中连续分离纯化,超声驻波频率2450-5000kHz,声强0.2-1.5kw,流量0.2-1.0L/min,紫外分光光度检测器波长260nm;
(7)稳定化处理:分离纯化斑蝥类毒素中加入稳定剂,在20-30℃条件下吸附10-24h,成为稳定性斑蝥类毒素。
2.根据权利要求1所述的斑蝥类毒素的制备方法,其特征在于所述蛋白酶为胃蛋白酶或胰蛋白酶。
3.根据权利要求1所述的斑蝥类毒素的制备方法,其特征在于所述溶剂体系由甲基叔丁基醚-正丁醇-乙腈-水按照2:2:1:6的体积比组成。
4.根据权利要求3所述的斑蝥类毒素的制备方法,其特征在于所述溶剂体系的有机相中加入10-30mmol/L三氟乙酸,水相中加入1-5mmol/L氨水。
5.根据权利要求1所述的斑蝥类毒素的制备方法,其特征在于所述稳定剂为Al(OH)3溶液或Ca3(PO4)2溶液。
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