[发明专利]一种头孢菌素C的发酵方法有效
申请号: | 201210310800.4 | 申请日: | 2012-08-28 |
公开(公告)号: | CN102808013A | 公开(公告)日: | 2012-12-05 |
发明(设计)人: | 杨勇;邓芸;黄海玉;王利春;刘思川;梁隆;程志鹏 | 申请(专利权)人: | 伊犁川宁生物技术有限公司 |
主分类号: | C12P35/06 | 分类号: | C12P35/06;C12R1/645 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;全学荣 |
地址: | 835000 新疆维吾尔自治区伊犁*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 头孢菌素 发酵 方法 | ||
1.一种头孢菌素C的发酵方法,其特征在于:它包括如下步骤:
(1)取顶头孢霉,制备一级种子、二级种子;
(2)取步骤(1)制备的二级种子,接种至顶头孢霉发酵培养基中发酵,在发酵过程的以下时间段内补入甲硫氨酸和硫酸铵,工艺如下:
甲硫氨酸:60-80h,流加3-7g/L·h;80-120h,流加5-9g/L·h;120-140h,流加4-8g/L·h;硫酸铵:50-90h,流加1-5g/L·h;90-120h,流加3-7g/L·h;120-140h,流加4-6g/L·h;
(3)将步骤(2)所得发酵液过滤,得上清,分离纯化,即得头孢菌素C。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)所述顶头孢霉是保藏号为ATCC 36225的顶头孢霉。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤(2)中,补入甲硫氨酸的工艺为:60-80h,流加4-6g/L·h;80-120h,流加6-8g/L·h;120-140h,流加5-7g/L·h;补入硫酸铵的工艺为:50-90h,流加2-4g/L·h;90-120h,流加4-6g/L·h;120-140h,流加3-5g/L·h。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述补入甲硫氨酸的工艺为:60-80h,流加6g/L·h,80-120h,流加8g/L·h,120-140h,流加7g/L·h;所述补入硫酸铵的工艺为:50-90h,流加4g/L·h,90-120h,流加6g/L·h,120-140h,流加5g/L·h。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述补入甲硫氨酸的工艺为:60-80h,流加5g/L·h,80-120h,流加7g/L·h,120-140h,流加6g/L·h;所述补入硫酸铵的工艺为:50-90h,流加3g/L·h,90-120h,流加5g/L·h,120-140h,流加4g/L·h。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)所述发酵的条件是:发酵温度:0-40h为28℃,40-140h为24-25℃;发酵pH为5.5-5.8;发酵时间:140h。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)所述发酵培养基包含如下成分:玉米浆40-75重量份、花生粉10-20重量份、葡萄糖5-12重量份、水解淀粉20-30重量份、甲硫氨酸3-8重量份、植物油50-70体积份、消沫剂1.5-3体积份、MgSO4 2-5重量份、(NH4)2SO4 8-15重量份、FeSO40.05-0.1重量份、MnSO4 0.01-0.04重量份、ZnSO4 0.01-0.04重量份、CuSO40.01-0.04重量份、CaCO3 5-10重量份。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述植物油为大豆油或者玉米油。
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