[发明专利]一种微藻培养及采收耦合快速积累藻油的方法

权利要求书

1.一种微藻培养及采收耦合快速积累藻油的方法，其特征在于所述方法为：

（1）将新鲜微藻细胞以体积分数5%的接种量接种在相应的微藻培养液中，通入空气，在自然光照下，5~40℃培养至对数生长期后，再在同样条件下培养1~33d，获得藻液；

（2）在步骤（1）获得的藻液中加入碱性水溶液调节pH值为10~13，或在步骤（1）获得的藻液中加入酸性水溶液调节pH值为1~5，室温静置1~5d使藻液分层，获得上层清液和下层沉淀，将下层沉淀过滤，取滤饼即获得藻泥，将藻泥采用有机溶剂A浸提、索氏抽提或酸法提取处理，获得所述藻油；所述有机溶剂A为下列之一：乙醇、乙醚、乙酸乙酯或石油醚；

（3）将步骤（2）的上层清液调节pH至7~8，获得调节pH值后的上层清液，并检测上层清液组成，将调节pH值后的上层清液各个组成补足至相应微藻培养液组成，获得再生微藻培养液，循环用于微藻培养。

2.如权利要求1所述微藻培养及采收耦合快速积累藻油的方法，其特征在于步骤（1）所述微藻为淡水微藻或海洋微藻。

3.如权利要求1所述微藻培养及采收耦合快速积累藻油的方法，其特征在于步骤（1）所述微藻为下列之一：眼拟点微绿球藻、杜氏盐藻、葡萄藻或小球藻。

4.如权利要求1所述微藻培养及采收耦合快速积累藻油的方法，其特征在于所述方法为：

（1）将新鲜微藻细胞以体积分数5%的接种量接种在相应的微藻培养液中，通入空气，在自然光照下，5~40℃培养至对数生长期后，再在同样条件下培养1~15d，获得藻液；所述微藻为海洋微藻；所述相应的微藻培养液为改良F/2培养液，终浓度组成为：NaNO₃25~1350mg/L、NaH₂PO₄·2H₂O5~270mg/L、Na₂SiO₃·9H₂O 20mg/L、Na₂EDTA 4.36mg/L、FeCl₃·6H₂O3.16mg/L、CuSO₄·5H₂O 0.01mg/L、ZnSO₄·7H₂O 0.023mg/L、CoCl₂·6H₂O0.012mg/L、MnCl₂·4H₂O 0.18mg/L、Na₂MoO₄·2H₂O 0.07mg/L、VB₁0.1μg/L、VB₂0.5μg/L、生物素0.5μg/L，溶剂为水，pH值为7~8；

（2）在步骤（1）获得的藻液中加入碱性水溶液调节pH值为10~13，或在步骤（1）获得的藻液中加入酸性水溶液调节pH值为1~5，室温静置1~5d使藻液分层，获得上层清液和下层沉淀，将下层沉淀过滤，取滤饼即获得藻泥，将藻泥采用有机溶剂B浸提、索氏抽提或酸法提取处理，获得所述藻油；所述有机溶剂B为下列之一：乙醇、乙醚、乙酸乙酯或石油醚；

（3）将步骤（2）的上层清液调节pH至7~8，获得调节pH值后的上层清液，在调节pH值后的上层清液中加入硝酸钠和磷酸二氢钠，使硝酸钠的终浓度为25~1350mg/L、磷酸二氢钠的终浓度为5~270mg/L，获得再生后的改良F/2培养液，循环用于微藻培养。

5.如权利要求4所述微藻培养及采收耦合快速积累藻油的方法，其特征在于步骤（1）所述微藻为眼拟点微绿球藻。

6.如权利要求4所述微藻培养及采收耦合快速积累藻油的方法，其特征在于步骤（1）所述培养温度为25~30℃。

7.如权利要求4所述微藻培养及采收耦合快速积累藻油的方法，其特征在于步骤（1）所述改良F/2培养液中NaNO₃的终浓度为225~1350mg/L，相应氮磷质量比为4:1。

8.如权利要求4所述微藻培养及采收耦合快速积累藻油的方法，其特征在于步骤（2）所述碱性水溶液为氢氧化钠水溶液或氢氧化钾水溶液，所述酸性水溶液为硫酸水溶液或盐酸水溶液。