[发明专利]一种鸡传染性支气管炎病毒减毒疫苗株及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程和免疫领域，具体地，为一种鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis virus，IBV)的减毒株、减毒株的衍生毒株以及其在IBV防治接种、疫苗组合物制备中的应用。

背景技术

鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis，IB)是IBV(Infectious Bronchitis virus，IBV)引起的一种急性、高度接触传染性传染病。IBV自然感染主要发生于鸡，各种年龄的鸡都易感。传染性支气管炎病毒主要侵害鸡的呼吸道，肾脏和输卵管。临床症状多见于六周龄以内的鸡，感染率高，但死亡率低。肉鸡感染之后，主要降低食物转换率、增重缓慢、同时可能出现继发感染，造成屠宰合格率低。10日龄以内的雌性雏鸡感染后，往往导致永久性输卵管破坏；但也危害育成鸡和产蛋鸡群，使之抵抗力降低、产蛋量及蛋的品质下降。

目前世界上流行着许多血清型/基因型的IBV。过去IBV的分型是按血清中和反应来确定血清型的。各血清型之间无交叉保护作用或交叉保护作用很低。随着分子生物学技术的发展，目前常常用S1蛋白的基因的核苷酸和氨基酸序列的比较来确定其基因型。在所有已知血清型中，马萨诸塞血清型(Massachusetts，以下简称Mass或M41)分布和流行最广，几乎世界各地有IBV的国家均有该血清型的流行。

根据国内外的研究报道，IBV不同血清型/基因型的分布具有明显的地域特征。Pan J.Y.等从青岛地区分离并鉴定出了一种腺胃型IBV毒株，命名为QX株(1999，Genebank access No.:AF193424)。后来在2004年，刘胜旺等报道在我国免疫鸡群和非免疫鸡群中也分离到QX基因型毒株，但病鸡多以肾炎为主。最近几年除呼吸道症状和肾脏变化外，雌性雏鸡感染后输卵管出现囊肿也非常常见。我国大陆当前同时流行多个血清型/基因型的IBV毒株，其中类QX型毒株(简称QX-like，亦称LX4-type)是最主要的优势流行株，比例超过50%，部分地区甚至高达75%。从2003年以来，类QX基因型IBV已在许多国家广泛流行，如荷兰、比利时、法国、德国、意大利、俄罗斯、韩国等，除呼吸道症状和肾脏变化外，雌性雏鸡感染后输卵管常出现囊肿。

美国常用的IBV疫苗株：1)Mass-type血清型如H120或Ma5；2)Delaware血清型如DE072；3)Georgia血清型如GA98；4)Connecticut血清型；5)Arkansas血清型等。欧洲常用的IBV疫苗株：1)Mass-type血清型如H120或Ma5或H52；2)4/91或793B血清型；3)D274血清型；4)D1466血清型；5)类QX基因型等。

我国广泛使用的疫苗均属于Mass-type血清型的毒株，包括H120、H52、Ma5和W93。当前国内流行毒株除Mass-type血清型外，还有相当一部分在遗传进化关系上与Mass-type疫苗毒株存在较大差异，因此我国已有疫苗不能有效地预防IB流行毒株的攻击。研究开发具有较好保护力的新血清型或基因型的疫苗，同时还能与Mass-type血清型IB减毒疫苗联合应用显得尤为重要，本发明研究开发了一种新的鸡传染性支气管炎减毒疫苗株，解决了以上所述问题。

发明内容

本发明的目的就是提供一种可用于保护禽类宿主以抵抗传染性支气管炎的减毒病毒株及其应用。

在本发明的第一方面，提供了一种鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis virus，IBV)的减毒株，所述减毒株是鸡传染性支气管炎减毒疫苗株IBV-KL05，保藏号为CCTCC.V201232。

在本发明的第二方面，提供了衍生自第一方面所述的鸡传染性支气管炎病毒的减毒株的衍生病毒株。

在另一优选例中，所述衍生病毒株具有以下一个或多个特性：

(a)低毒力：毒力与CCTCC.V201232的毒力相近或相同；

(b)所述的衍生病毒株中S1基因的第1-1643位的核苷酸序列如SEQ ID NO.:1所示；

(c)所述衍生病毒株表达的S1蛋白的第54位氨基酸为异亮氨酸(Ile)；

(d)所述衍生病毒株表达的S1蛋白的第1-547位如SEQ ID NO.:2所示。

本发明的减毒株和所述衍生病毒株安全性好：可用于肉鸡、蛋鸡和种鸡的免疫接种；可用于一日龄或一日龄以上(如2-9日龄)鸡的免疫接种；和/或可用于蛋鸡和种鸡在产蛋期间的免疫接种。