[发明专利]抗猪瘟病毒和猪圆环病毒感染的疫苗组合物及制备和应用

说明书

技术领域

本发明属于畜类生物制药技术领域，涉及一种猪用疫苗组合物，具体说来，涉及一种抗猪瘟病毒和猪圆环病毒2型感染的二联疫苗组合物及其制备和应用。

背景技术

猪瘟(classical swine fever，CSF)是由猪瘟病毒(classical swine fever virus，CSFV)引起的一种严重危害养猪业的毁灭性传染病。该病死亡率高达80％～90％，世界动物卫生组织(OIE)将其列为OIE疾病名录，我国也将其列为一类传染病。猪瘟的防制历来是全世界猪瘟存在国非常重视的课题，为此各国都投入了大量的人力、物力，并取得了很大的成绩。目前疫苗接种仍是控制猪瘟的重要手段。我国生产的猪瘟兔化弱毒疫苗有脾淋苗、乳兔组织苗、牛睾丸原代细胞苗及最近两年发展起来的猪睾丸传代细胞苗，这些工艺生产的猪瘟疫苗普遍存在生产工艺复杂、易受外源病毒污染、产毒滴度不高、批间差异大等缺点，给疫苗产量及质量的提高带来困难。

猪圆环病毒(Porcine circovirus，PCV)属于圆环病毒科(Circoviridae)圆环病毒属(Circovirus)，无囊膜，是目前发现的最小的动物病毒。猪圆环病毒现己成为全球广泛传播的猪病病毒，其具有流行范围广、各生长阶段猪感染严重、混合感染突出等特点，PCV2在我国的流行始于2000年，在我国该病毒的阳性率也呈逐年上升的趋势，目前在许多省份危害严重，给我国养猪业造成了巨大的损失，严重威胁了我国养猪业的发展。目前世界上研发的圆环病毒疫苗主要种类有：PCV2全病毒灭活疫苗CIRCOVAC；PCVI-PCV2嵌合病毒灭活疫苗SuvaxynPCV2；杆状病毒表达多联疫苗CircoFLEX和PorcilisPCV。

目前免疫接种仍是我国防治猪瘟和猪圆环病毒病的重要措施。但猪用疫苗品种很多，在实际操作中，多针次、多剂量、多种免疫程序难以合理安排，既繁琐、费时、费力、增加成本，且容易造成漏种，直接影响免疫效果。

专利CN 101277717A公开了一种对抗猪圆环病毒2型(PCV-2)的疫苗，该疫苗由至少20微克/剂量的猪圆环病毒2型(PCV-2)与ORF-2蛋白或重组ORF-2蛋白构成，其重组蛋白优选通过由杆状病毒表达载体在昆虫细胞中表达的方式产生。该疫苗可用于保护仔猪免受PCV-2感染(并因此对抗PMWS)。该疫苗只能防治一种病，且其亚单位抗原经乳化后保存时间短。

中国专利CN 101181637A公开了一种用细胞系生产猪瘟活疫苗的方法，该方法通过选择细胞系作为制苗用细胞，并对制苗用细胞的传代与培养，然后进行细胞毒种的繁殖及制苗毒液的繁殖，最后进行配苗、分装及冻干来生产猪瘟活疫苗。该方法种毒制备过程繁琐，可控性差，批间差异大，生产周期长，只能防治一种疾病。

因此，目前存在的问题是需要研究开发一种生产工艺简单，疫苗质量好，可以同时防治猪瘟、猪圆环病毒病两种传染病，并能避免多次接种造成免疫应激反应及免疫效果降低的疫苗及其制备方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种抗猪瘟病毒和猪圆环病毒2型感染的二联疫苗组合物及其制备和应用。该二联疫苗组合物含有圆环病毒2型抗原和猪瘟病毒抗原，可以同时防治猪瘟、猪圆环病毒病两种传染病，与单苗相比，该二联疫苗组合物并没有产生免疫干扰现象，疫苗免疫效果没有下降，采用该二联疫苗组合物免疫后猪瘟病毒抗原产生的免疫反应加快了，且二联疫苗组合物中圆环病毒2型疫苗产生的抗体与单苗免疫效果相当。该二联疫苗组合物的制苗工艺简单，生产效率高。经动物实验证明，该疫苗组合物的免疫效果优于单苗免疫效果，具有很大的应用价值。

为此，本发明提供了一种抗猪瘟病毒和猪圆环病毒2型感染的二联疫苗组合物，其包含猪瘟病毒抗原和猪圆环病毒2型抗原。

在本发明的一个实施例中，在所述二联疫苗组合物中，猪瘟病毒抗原与猪圆环病毒2型抗原的体积比为1∶2。

根据本发明，所述猪瘟病毒抗原为灭活形式、改良的活的形式或减毒形式的猪瘟病毒抗原中的一种或几种，并且，所述猪瘟抗原选自猪瘟全病毒、含有猪瘟病毒免疫原性氨基酸序列的嵌合病毒，任何至少含猪瘟病毒免疫原性氨基酸序列的多肽或亚单位成分中一种或几种；优选所述猪瘟病毒抗原为猪瘟病毒兔化弱毒株全病毒抗原。

本发明中，所述猪瘟病毒抗原接种猪可诱导、刺激或增强抵抗猪瘟病毒感染的免疫应答。所述二联疫苗组合物中每剂量或每头份(2ml)含猪瘟病毒抗原为10^4.0TCID₅₀。