[发明专利]一种褐藻中岩藻黄素的提取纯化方法

说明书

技术领域

本发明属于海洋生物天然产物技术领域，具体涉及一种褐藻中岩藻黄素的提取纯化方法。

背景技术

自1982年《联合国海洋法公约》签订以来，世界各海洋国家纷纷将开发利用海洋资源作为国家战略决策，大力推动相关科学研究和技术产业的发展。海洋天然产物作为重要的研究分支，提供了大量具有药用价值的活性物质。

岩藻黄素作为海洋天然活性物质中的一种，在海洋环境中分布尤为广泛，其含量占到了类胡萝卜素自然总含量的10%左右。但与β-胡萝卜素等类胡萝卜素不同的是，岩藻黄素是首个从褐藻中分离出的有特殊的丙二烯碳骨架的分子，因而它具有极强的抗氧化能力。同时，岩藻黄素分子含有羟基、酯键和多个不饱和α,β-不饱和键，可以作为接受体与很多重要蛋白发生麦克加成反应，从而改善生物体的代谢循环，发挥其生物活性功能。

通过现阶段细胞培养和动物实验表明，岩藻黄素具有促进健康的作用。特别是在抗氧化、抗炎、抗癌、抗血栓、抗疟疾、抑制肥胖和糖尿病，以及肝脏、脑、骨骼、皮肤、眼睛和心血管系统的保护作用方面具有极大的潜在药用价值。与目前的同类成品药物β-胡萝卜素和虾青素相比，岩藻黄素在抑制肥胖、成熟T细胞增值和海勒癌细胞发育方面有着更加突出的表现。尽管人体直接食用藻类过程中岩藻黄素的生物利用率较低，但通过食用纯化岩藻黄素和食用油脂混合可以大大提高岩藻黄素的吸收率，以及岩藻黄醇和Amarouciaxanthin A等岩藻黄素代谢中间产物在体内的浓度。同时生物毒理实验表明，服用岩藻黄素具有毒副作用小、不影响脂代谢循环等特点，因而岩藻黄素是一种具有极大潜在药用价值和经济价值的海洋活性天然产物。

目前国外很多企业和科研单位都已经将岩藻黄素应用于新药的开发研制。日本也已经推出了以岩藻黄素为添加物的护肤品，并获得了较高的市场占有率。但就目前来说，岩藻黄素市场主要存在两个问题。一是国内外高纯度岩藻黄素市场仍然空缺。而且在我国，高纯度岩藻黄素主要还是依赖国外进口。二是分离成本过高，分离工程中环境污染严重。因此急需一种操作简单经济环保的分离纯化技术，以满足国内市场对岩藻黄素的需求。

迄今为止，关于岩藻黄素的提取的专利有中国公开号为CN1706836（一种从海藻中分离岩藻黄素的方法）、CN101565411（一种从褐藻中分离岩藻黄素的方法）等。CN1706836涉及用二甲基亚砜在黑暗中浸提新鲜海藻，CN101565411是将新鲜的褐藻打浆,加入有机试剂,再加入质量千分数为0.5-1的抗氧化剂,浸提22-26小时后抽滤,得到浸提液。二甲基亚砜沸点高且较贵，后续处理成本很高；且CN101565411专利中所采用的方法，操作时间长，产品得率较低。

发明内容

本发明的目的是提供一种褐藻中岩藻黄素的提取纯化方法，即提供一种分离制备岩藻黄素的方法，以弥补现有技术的不足。

本发明的岩藻黄素，其分子式为：

本发明的提取方法，包括如下的步骤：

1）在褐藻粉内添加丙酮和甲醇混合溶剂进行超声浸提，浸提液浓缩蒸干获得初提样品；

2）将1）中获得的初提样品加入甲醇进行溶解，溶解液样品进行紫外/可见光谱分析，选取450nm处吸收峰的样品作为褐藻浸提液进行后续的分离纯化；

3）对2）中制备的褐藻浸提液进行柱层析分离，柱填料为硅藻土，用食用石油醚和丙酮的混合溶剂做洗脱剂；获得洗脱液并浓缩；

4）使用HPLC对步骤3）中获得的洗脱液再进行分离，选用正向ODS柱，石油醚、二氯甲烷和丙酮的混合试剂作为流动相，色谱分离获得高纯化岩藻黄素。

其中步骤1）中丙酮和甲醇混合溶剂中丙酮和甲醇的体积比为3:1。

其中步骤3）中食用石油醚和丙酮体的积比为1：0.43～2.33。

其中步骤4）石油醚、二氯甲烷和丙酮的混合试剂中石油醚、二氯甲烷和丙酮的体积比为：10:5:3。

本发明的岩藻黄素是一种具有潜在药用价值的海洋天然产物。可以用于新型抗氧化、抗炎、抗癌、抗血栓、抗疟疾、抑制肥胖和糖尿病药物的研发，同时也可开发为保肝、减肥和保护视力的保健品，以及美白保湿的护肤品等。