[发明专利]具有抗脂质累积活性的枳壳组分制备方法及用途

说明书

技术领域

 本发明属中药化学领域，具体地说涉及一种从枳壳中提取的有效组分及其制备方法，以及该组分在制备非酒精性脂肪肝治疗药物中的应用。

背景技术

肝损伤是由多种病因引起且有多种因素参与的复杂过程。肝损伤引发的肝脏疾病已成为常见病、多发病，更为严重的是其引发的肝功能衰竭和肝性脑病等，发病率和死亡率高，极大地威胁着人类健康。很多因素可引起肝损伤。非酒精性脂肪肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD），又称非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver，NAFL），是一种无过量饮酒史，以肝实质细胞脂肪变性和脂肪贮积为特征的临床病理综合征。非酒精性脂肪肝包含一系列的肝脏疾病，从单一的脂肪变性到不同程度的脂肪变性联合坏死和纤维化。而肝细胞内脂质异常累积则是脂肪肝疾病发生的最主要因素。油酸是人体内最为丰富的脂肪酸之一，它参与形成肝脏中的三酸甘油酯并能促进脂滴的形成，油酸诱导HepG2脂肪累积是一种常用的脂质累积细胞模型，可用于评价药物的抗脂质累积作用。

目前，非酒精性脂肪肝治疗方法有很多，且均有一定疗效，但也存在着明显的不足。首先，西药具有较大的毒副作用，且疗效并不确切。而另一方面，实验和临床研究证实，中药在改善肝功能、抗氧化、改善微循环、调节免疫功能以及抗肝纤维化等方面显示出良好的疗效，安全、可靠、有效，进一步显示出中医辨证论治的合理性，突显了中药在治疗称非酒精性脂肪肝方面的良好前景。

枳壳是为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实，其性味苦、酸，性微寒，主治胸隔痞满、胁肋胀痛、食积不化、脘腹胀满等。现代药理学研究表明，枳壳对胃肠平滑肌呈双向作用，既可兴奋胃肠道平滑肌，又可降低胃肠平滑肌张力；能预防大鼠幽门结扎溃疡形成，具有显著减少胃液分泌量及降低胃蛋白酶活性的作用；此外还具有增加冠脉流量和肾血流血，降低心肌氧耗量等作用。但枳壳组分是否具有抑制肝细胞脂质累积的活性尚不清楚。

发明内容

本发明的目的是提供一种枳壳有效组分，该有效组分主要含有A柚皮苷，B新橙皮苷两种化合物，其中A的含量为20%-42%，B的含量为20%-48%。

优选A的含量为30~40%，B的含量为30~40%。

本发明的另一目的是提供该枳壳有效组分的制备方法，通过以下步骤实现：将枳壳药材粉碎后加入20%~90%的乙醇，加热回流0.8~1.2小时，提取1~3次，合并滤液得提取液，将提取液浓缩成浸膏，并将其与大孔树脂进行拌样，用大孔树脂柱对其进行纯化，收集70%乙醇洗脱液，浓缩后经聚酰胺柱纯化后收集20%乙醇洗脱液，经浓缩干燥后得到有效组分。

本发明的再一个目的是提供该枳壳有效组分在制备非酒精性脂肪肝治疗药物中的应用。

具体地：

本发明第一方面提供了一种枳壳提取物(在本发明中亦可称为枳壳有效组分)，其中含有柚皮苷和新橙皮苷，并且其中柚皮苷的含量为20%-42%，新橙皮苷的含量为20%-48%。在一个实施方案中，柚皮苷的含量为30~40%，新橙皮苷的含量为30~40%。在一个实施方案中，柚皮苷的含量为25~35%，新橙皮苷的含量为20~30%。

本发明第一方面还提供了一种枳壳提取物(在本发明中亦可称为枳壳有效组分)，其中含有柚皮苷和新橙皮苷，并且其中含有20-42重量份的柚皮苷，和含量为20-48重量份的新橙皮苷。在一个实施方案中，该枳壳提取物中含有30-40重量份的柚皮苷，和含量为30-40重量份的新橙皮苷。在一个实施方案中，该枳壳提取物中含有25-35重量份的柚皮苷，和含量为20-30重量份的新橙皮苷。

根据本发明第一方面的枳壳提取物，其是通过以下方法制备得到的：将枳壳药材粉碎后加入20%~90%(例如60-80%，例如65-75%)的乙醇，加热回流提取1~3次，合并滤液得提取液，将提取液浓缩成浸膏，并将其与大孔树脂进行拌样，用大孔树脂柱对其进行纯化，收集60~80%乙醇洗脱液，浓缩，经聚酰胺柱纯化，收集20%乙醇洗脱液，经浓缩干燥，即得。