[发明专利]牟氏角毛藻培养基配方及白塑料桶充气培养方法

权利要求书

1.一种牟氏角毛藻培养基，其特征在于该牟氏角毛藻培养基配方如下：

CO(NH₂)₂(尿素)21.5mg，KH₂PO₄8mg，FeC₆H₅O₇·5H₂O(柠檬酸铁)0.5mg，Na₂SiO₃·9H₂O8mg，NaHCO₃ 500mg，九二0植物生长刺激素(即赤霉素)5国际单位，VB₁₂5×10^-4mg，VB₁0.1mg，海水1000mL。

2.如权利要求1所述的一种牟氏角毛藻培养基，其特征在于该牟氏角毛藻培养基配方如下：

CO(NH₂)₂(尿素)21.5mg，KH₂PO₄8mg，FeC₆H₅O₇·5H₂O(柠檬酸铁)0.5mg，Na₂SiO₃·9H₂O8mg，NaHCO₃ 500mg，九二0植物生长刺激素(即赤霉素)5国际单位，VB₁₂5×10^-4mg，VB₁0.1mg，VB₆0.1mg，柠檬酸铁铵1mg，ZnSO₄500mg，体积比1％的钼酸水溶液15ml，硫酸锰5mg，磷酸二氢钾10mg，氯化钾3mg，海水1000mL。

3.一种牟氏角毛藻培养方法，其特征在于包括如下步骤：

采用白塑料桶充气培养方法；白色塑料桶为市场售常用聚乙烯塑料桶，圆筒形，直径30cm，高60cm，加满水约6.5×10⁴ml，消毒海水洗净，再用蒸馏水润洗3遍，桶口处用酒精擦洗消毒备用；白色塑料桶置于室外水泥地上，顶部有透明玻璃钢瓦遮阴，四周开放式，将白桶放置于离地0.5m的水泥板上，自然光照射，最佳温度25-30℃，最佳光照强度10000-15000lx，或人工光源光照，60～100瓦电灯或日光灯，需1500～3000勒克斯/厘米²；培养用海水采用漂白液(次氯酸钠)氧化法消毒；漂白液氧化法消毒方法是1m³海水中加入漂白液200～300mL，使海水中有效氯含量达到10～20mg/L，充气8～12h后，用硫代硫酸钠中和余氯；硫代硫酸钠量由余氯的多少来确定，直到滴入淀粉碘化钾液不变色为止。

按照权利要求1所述的牟氏角毛藻培养基配方添加培养基，藻种要选择生长良好、生活力旺盛、色泽鲜艳、无沉淀及无明显附壁现象的藻种，镜检无其它杂藻、原生动物等；充气培养，接种密度为30×10⁴cell/mL，充入空气和二氧化碳混合气体，体积比比例为V_空气∶V_二氧化碳＝15∶1，充气量不宜太大，以藻细胞浮起不下沉即可；夜间停止充气，白天行间隔充气，即充气1小时，停1小时，重复进行；用透明薄膜盖于桶上部，然后用橡皮筋拉紧，进行封闭式培养；经过5-7天的培养，密度达300×10⁴-400×10⁴cell/mL即可采收或转入下一级培养。

4.如权利要求3-4所述的牟氏角毛藻培养方法，其特征在于包括在充气培养时充入空气和二氧化碳、臭氧混合气体，体积比比例为V_空气∶V_二氧化碳∶臭氧＝15∶1∶1。