[发明专利]一种聚乙二醇选择性修饰蛋白C端羧基的方法在审
| 申请号： | 201210300769.6 | 申请日： | 2012-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN103626831A | 公开（公告）日： | 2014-03-12 |
| 发明（设计）人： | 胡涛;王俊;苏志国;马光辉;安红波 | 申请（专利权）人： | 中国科学院过程工程研究所 |
| 主分类号： | C07K1/107 | 分类号： | C07K1/107;C12N9/96;C12N9/48 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100190 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 聚乙二醇 选择性 修饰 蛋白 羧基 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种聚乙二醇选择性修饰蛋白质和多肽的C末端羧基的方法，主要步骤为：在2-200mM的2-(N-吗啡啉)乙磺酸pH 4.5-8.0的缓冲液体系中，将蛋白质或多肽的羧基与胱胺的氨基用碳二亚胺进行交联反应，其中蛋白质或多肽：胱胺：碳二亚胺的比例为1:5-10:2-50，胱胺所携带的二硫键经三(2-羧乙基)膦还原后，生成的巯基与单甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺反应，从而实现蛋白质和多肽C末端羧基的PEG选择性修饰。
2.根据权利要求1所述的聚乙二醇选择性修饰蛋白质和多肽的C末端羧基的方法，所述蛋白质或多肽为葡激酶，但不限于葡激酶，还适用于其它蛋白质和多肽C末端羧基的选择性修饰。
3.根据权利要求1所述的聚乙二醇选择性修饰蛋白质和多肽的C末端羧基的方法，蛋白质或多肽的羧基与胱胺的交联反应中，胱胺含有2个伯氨和1对二硫键。
4.根据权利要求1所述的聚乙二醇选择性修饰蛋白质和多肽的C末端羧基的方法，所述MES缓冲液体系中不含羧基和氨基，避免对羧基与胱胺的交联反应造成影响。
5.根据权利要求1所述的聚乙二醇选择性修饰蛋白质和多肽的C末端羧基的方法，所述聚乙二醇修饰剂是可修饰巯基的直链型或Y型的单甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺，这两类修饰剂中聚乙二醇的分子量范围是1000-40000道尔顿。
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