[发明专利]与多个分子的抗原反复结合的抗原结合分子

权利要求书

1. 抗体的筛选方法，该筛选方法包括以下步骤：

(a) 测定pH6.7~pH10.0下的抗体的抗原结合活性的步骤；

(b) 测定pH4.0~pH6.5下的抗体的抗原结合活性的步骤；

(c) 选择pH6.7~pH10.0下的抗原结合活性高于pH4.0~pH6.5下的抗原结合活性的抗体的步骤，

其中，该抗体被用作药物组合物、且为以下(i)～(vi)中任一项所述的抗体：

(i) 血浆中滞留性优异的抗体；

(ii) 在包含表达FcRn的细胞的非人类动物的测定中，能够与抗原进行两次以上结合的抗体；

(iii) 在包含表达FcRn的细胞的非人类动物的测定中，可结合的抗原数多于抗原结合位点的抗体；

(iv) 在细胞内解离在细胞外结合的抗原的抗体；

(v) 以与抗原结合的状态摄入细胞内、以未与抗原结合的状态被释放到细胞外的抗体；或

(vi) 血浆中抗原消除能力增加的抗体。

2. 权利要求1所述的筛选方法，其特征在于：选择pH6.7~pH10.0下的抗原结合活性为pH4.0~pH6.5下的抗原结合活性的两倍以上的抗体。

3. 抗体的筛选方法，该筛选方法包括以下步骤：

(a) 在pH6.7~pH10.0的条件下使抗体与抗原结合的步骤；

(b) 将(a)的与抗原结合的抗体置于pH4.0~pH6.5的条件下的步骤；

(c) 获得在pH4.0~pH6.5的条件下解离的抗体的步骤，

其中，该抗体被用作药物组合物、且为以下(i)～(vi)中任一项所述的抗体：

(i) 血浆中滞留性优异的抗体；

(ii) 在包含表达FcRn的细胞的非人类动物的测定中，能够与抗原进行两次以上结合的抗体；

(iii) 在包含表达FcRn的细胞的非人类动物的测定中，可结合的抗原数多于抗原结合位点的抗体；

(iv) 在细胞内解离在细胞外结合的抗原的抗体；

(v) 以与抗原结合的状态摄入细胞内、以未与抗原结合的状态被释放到细胞外的抗体；或

(vi) 血浆中抗原消除能力增加的抗体。

4. 第一pH下的结合活性高于第二pH下的结合活性的抗体的筛选方法，该筛选方法包括以下步骤：

(a) 在第一pH条件下使抗体与固定有抗原的柱结合的步骤；

(b) 在第二pH条件下从柱上洗脱在第一pH条件下与柱结合的抗体的步骤；

(c) 获得被洗脱的抗体的步骤，

其中，第一pH为pH6.7~pH10.0，第二pH为pH4.0~pH6.5，该抗体被用作药物组合物、且为以下(i)～(vi)中任一项所述的抗体：

(i) 血浆中滞留性优异的抗体；

(ii) 在包含表达FcRn的细胞的非人类动物的测定中，能够与抗原进行两次以上结合的抗体；

(iii) 在包含表达FcRn的细胞的非人类动物的测定中，可结合的抗原数多于抗原结合位点的抗体；

(iv) 在细胞内解离在细胞外结合的抗原的抗体；

(v) 以与抗原结合的状态摄入细胞内、以未与抗原结合的状态被释放到细胞外的抗体；或

(vi) 血浆中抗原消除能力增加的抗体。

5. 第一pH下的结合活性高于第二pH下的结合活性的抗体的筛选方法，该筛选方法包括以下步骤：

(a) 在第一pH条件下使抗体文库与固定有抗原的柱结合的步骤；

(b) 在第二pH条件下从柱上洗脱抗体的步骤；

(c) 扩增编码被洗脱的抗体的基因的步骤；

(d) 获得被洗脱的抗体的步骤，

其中，第一pH为pH6.7~pH10.0，第二pH为pH4.0~pH6.5，该抗体被用作药物组合物、且为以下(i)～(vi)中任一项所述的抗体：

(i) 血浆中滞留性优异的抗体；

(ii) 在包含表达FcRn的细胞的非人类动物的测定中，能够与抗原进行两次以上结合的抗体；

(iii) 在包含表达FcRn的细胞的非人类动物的测定中，可结合的抗原数多于抗原结合位点的抗体；

(iv) 在细胞内解离在细胞外结合的抗原的抗体；

(v) 以与抗原结合的状态摄入细胞内、以未与抗原结合的状态被释放到细胞外的抗体；或

(vi) 血浆中抗原消除能力增加的抗体。

6. 权利要求1~5中任一项所述的筛选方法，其中抗体是抗体中的至少1个以上的氨基酸被组氨酸取代或插入至少1个组氨酸的抗体。