[发明专利]一种制备绵羊MSTN基因单克隆抗体疫苗的方法有效
| 申请号： | 201210295858.6 | 申请日： | 2012-08-20 |
| 公开（公告）号： | CN103626869A | 公开（公告）日： | 2014-03-12 |
| 发明（设计）人： | 李树伟 | 申请（专利权）人： | 李树伟 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C07K14/47;C12N15/12;C12N15/63;A61K39/395;A61P21/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 843300 新疆阿拉尔市*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 制备 绵羊 mstn 基因 单克隆抗体 疫苗 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备绵羊MSTN基因单克隆抗体疫苗的方法，其特征在于，依下述方法步骤进行：
(1)利用生物信息学方法分析并筛选绵羊MSTN基因的抗原表位；
(2)将这些抗原表位串联成3种组合模式，人工合成这些绵羊MSTN基因抗原表位组合模式；
(3)利用基因克隆与原核表达技术分别进行这些抗原表位组合模式的克隆与原核表达，利用PCR、酶切、序列测定检测基因克隆结果；利用SDS-PAGE技术检测原核表达的结果，检测结果表明获得了序列正确的3种组合模式的抗原肽；
(4)免疫小鼠，并检测血清抗体效价，在抗体效价达到要求后获取小鼠脾脏B淋巴细胞；
(5)准备骨髓瘤细胞，并将骨髓瘤细胞与前面制备好的小鼠脾脏B淋巴细胞进行细胞融合；
(6)进行杂交瘤细胞的克隆化培养，并检测杂交瘤细胞的抗体效价；
(7)利用Western Blot技术检测抗原的特异性结合，并用ELISA法检测单克隆抗体的抗原性；
(8)最后，进行单克隆抗体亚型的鉴定。
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