[发明专利]拟南芥JAV1蛋白及其编码基因在调控植物抗病和抗虫性中的应用有效
申请号: | 201210293627.1 | 申请日: | 2012-08-16 |
公开(公告)号: | CN103589722A | 公开(公告)日: | 2014-02-19 |
发明(设计)人: | 谢道昕;胡珀;周武 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/21;C12N7/01;C12N15/84;A01H5/00 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 100084 北京市海淀区北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 拟南芥 jav1 蛋白 及其 编码 基因 调控 植物 抗病 抗虫性 中的 应用 | ||
技术领域
本发明涉及一种拟南芥JAV1蛋白及其编码基因在调控植物抗病和抗虫性中的应用。
背景技术
植物在进化过程中会形成对害虫或病原菌危害所产生的一定程度的避害、耐害或抗生的生态适应性。根据植物抗性研究开展的植物抗性基因工程是利用分子遗传学原理,鉴定和分离抗性基因,并将抗性基因导入受体,获得抗性稳定表达并遗传的再生个体的生物技术。抗性基因多来自于天然的抗逆性生物,或是植物在逆境中产生的起保护作用的基因。将这些基因转移到抗性差的品种中,就可以提高抗逆性。该技术多以过表达外源抗性基因为主,不同物种之间的差异可能会影响抗性效果。拟南芥(Arabidopsis thaliana)隶属被子植物门双子叶植物纲十字花科,是现代国际和国内进行植株生物学研究的模式植物。拟南芥作为研究的模式植物得益于几个特点:基因组小,仅有5条染色体,约24000个基因;植株小;结子多;适于人工培养。对拟南芥基因功能的深入研究将有助于作物性状的遗传改良。
发明内容
本发明的目的是提供拟南芥JAV1蛋白的新用途。该蛋白的氨基酸序列如序列表序列1所示,所述新用途即所述蛋白可用于调控目的植物的病害抗性和/或虫害抗性,或调节序列表序列1所示蛋白表达量的物质或方法可用于调控目的植物的病害抗性和/或虫害抗性。
所述病害可为传染性病害或非传染性病害;所述传染性病害的生物病原物可为真菌、细菌、病毒和线虫;所述真菌具体可为灰霉菌(Botrytis cinerea)。
所述虫害的致病害虫可为夜蛾、蕈蚊或蚜虫;
所述夜蛾具体可为甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)、斜纹夜蛾(Spodoptera litura)或棉铃虫(Heliothis armigera);
所述蕈蚊具体可为迟眼蕈蚊(Bradysia impatiens)或韭菜迟眼蕈蚊(Bradysia odoriphage);
所述蚜虫具体可为桃蚜(Myzus persicae Sülzer)。
本发明提供一种发夹RNA,其核苷酸序列由一个茎环序列及位于所述茎环序列两侧的序列A和序列B组成,所述序列A和序列B反向互补;所述序列A为序列表序列1所示蛋白的编码基因中200-500bp DNA转录得到的RNA序列。
所述蛋白的编码基因中的200-500bp的DNA中不含有所述蛋白的编码基因的5’UTR区或3’UTR区序列。
所述蛋白的编码基因具体可为序列表序列2所示的DNA分子;其中,所述5’UTR区为序列表序列2的自5’末端第1位至第259位核苷酸;所述3’UTR区为序列表序列2的自5’末端第839位至第1129位核苷酸。
所述蛋白的编码基因中的200-500bp的DNA具体可为序列表序列2的第260-559位核苷酸序列所示的DNA。
由上述任一所述发夹RNA衍生的小干扰RNA也属于本发明的保护范围。
所述发夹RNA具体可为由如下序列依次相连组成的DNA片段转录形成的RNA:序列表序列2的第260-559位核苷酸序列、载体pTCK303的Kpn I和Spe I位点间的核苷酸序列和序列表序列2的第260-559位核苷酸序列的反向互补序列。
本发明提供上述任一所述RNA(发夹RNA或小干扰RNA)的编码基因。
所述RNA的编码基因具体为如下1)或2)的DNA分子:
1)式I所示的DNA片段,(I)SEQ正向-X-SEQ反向,
所述SEQ正向是序列表序列2中包括第260位至第559位的核苷酸段,
所述SEQ反向的序列与所述SEQ正向的序列反向互补,
所述X是所述SEQ正向与所述SEQ反向之间的间隔序列,在序列上,所述X与所述SEQ正向及所述SEQ反向均不互补;
2)与1)限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同一性且抑制序列表序列1所示蛋白表达的DNA分子。
所述SEQ正向的核苷酸序列具体可为序列表序列2中第260位至第559位核苷酸序列。
本发明保护下述3)或4)的DNA分子:
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