[发明专利]铁皮石斛高效组培快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体来说是一种铁皮石斛的组织培养方法。

背景技术

铁皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Until.)为兰科石斛属多年生草本植物，别名铁皮兰、黑节草等。是一种分布在岩溶地区的珍贵中药材植物，民间有“救命仙草”、“中华仙草”的美称。石斛属植物的茎段又名“石斛枫斗”，为一种传统中药，其中所含有的石斛多糖具有益胃生津、抑制肿瘤等作用。早在1900年前的《神农本草经》上就有关于石斛的记载。入药的石斛主要有铁皮石斛、霍山石斛、束花石斛、美花石斛以及金钗石斛，其中以铁皮石斛的药效最为显著。然而铁皮石斛生长条件十分苛刻，自然产量极少，更因民间长期过度采挖，致使野生资源濒临绝种，国内市场供应紧缺，国际市场干品价已达1000美元/kg以上。建立高效的组培快繁体系是推进铁皮石斛药源良性发展的有效途径。

发明内容

本发明的目的在于提供一种铁皮石斛的组织培养方法，以提高铁皮石斛的组织培养的分芽率和苗木质量。

本发明通过如下的技术方案实现。

一种铁皮石斛的组织培养方法，包括：

提供LED光源；

提供适宜于所述LED光源的多层矮化培养架；

在所述LED光源下铁皮石斛分芽培养；和

在所述LED光源下铁皮石斛生根培养。

优选地，所述培养架层间距15cm，宽50cm，长150cm，15m²培养室，可放置12个培养架，每个培养架12层，实现苗木培养14,400瓶。

优选地，所述LED光源使用24V LED灯带，每架3条，实现3000lx的均匀光照强度。

优选地，所述LED光源的光照控制器采用14/10小时的光/暗培养。

优选地，所述铁皮石斛分芽培养所使用的原球茎增殖培养基中的药品包括：

1800mg/L的KNO₃

360mg/L的NH₄NO₃

270mg/L的KH₂PO₄

600mg/L的Ca(NO₃)₂

362.5mg/L的MgSO₄.7H₂O

22.3mg/L的MnSO₄.4H₂O

8.6mg/L的ZnSO₄.7H₂O

6.2mg/L的H₃BO₃

0.83mg/L的KI

适量的Na₂Mo₄.2H₂O

0.025mg/L的CuSO₄.5H₂O

0.025mg/L的CoCl₂.6H₂O

0.025mg/L的AlCl₃

37.3mg/L的Na₂EDTA

27.8mg/L的FeSO₄.7H₂O

100mg/L的肌醇

4mg/L的甘氨酸

12mg/L的VB₁

1.2mg/L的VB₆

2.5mg/L的烟酸

2-4mg/L的D-泛酸钙

2mg/L的VC

5mg/L的L-半胱氨酸

0.24mg/L的生物素

2mg/L的6BA

1.2mg/L的活性炭

1.5g/L的香蕉泥

1.0g/L的土豆泥。

优选地，所述铁皮石斛生根培养所使用的生根壮苗培养基中的药品包括：

246.6mg/L的KNO₃

216mg/L的NH₄NO₃

334.8mg/L的KH₂PO₄

250.2mg/L的Ca(NO₃)₂