[发明专利]一种微生物谷胺酰转氨酶的分离纯化方法无效
| 申请号： | 201210276705.7 | 申请日： | 2012-08-06 |
| 公开（公告）号： | CN102776160A | 公开（公告）日： | 2012-11-14 |
| 发明（设计）人： | 韩红辉;刘明耀;陈益华;易正芳;金明飞;常忠义 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10 |
| 代理公司： | 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) 31257 | 代理人： | 董红曼 |
| 地址： | 200062 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 微生物 谷胺酰 转氨酶 分离 纯化 方法 | ||
1.一种微生物谷氨酰胺转胺酶的分离纯化方法，其特征在于，在链霉菌发酵液中加入50-200mg/L的分散酶处理，经乙醇沉淀、阴离子交换层析、阳离子交换层析，再经脱盐、浓缩、过滤、冻干后得到所述微生物谷氨酰胺转胺酶；其中，所述微生物谷氨酰胺转胺酶的纯度大于95%，比活力为20000-50000U/g。
2.如权利要求1所述的微生物谷氨酰胺转胺酶的分离纯化方法，其特征在于，所述链霉菌发酵液为茂源链霉菌STK4突变菌株发酵液；所述微生物谷胺酰胺转胺酶的第10位氨基酸为丝氨酸或苏氨酸；第241位氨基酸为丙氨酸或甘氨酸；第284位氨基酸为缬氨酸或者酪氨酸。
3.如权利要求1所述的微生物谷氨酰胺转胺酶的分离纯化方法，其特征在于，所述阴离子交换层析步骤中，上样缓冲液为pH 7.0-7.5的Tris-HCl缓冲液；洗脱液为0-2mol/L的NaCl溶液。
4.如权利要求1所述的微生物谷氨酰胺转胺酶的分离纯化方法，其特征在于，所述阳离子交换层析步骤中，上样缓冲液为Ph5.5-6.5的PB缓冲液；洗脱液为pH 7.0，0-1mol/L的NaCl溶液。
5.如权利要求1所述的微生物谷氨酰胺转胺酶的分离纯化方法，其特征在于，在所述样品上离子交换层析柱前用0.45μm - 0.22μm的纤维过滤膜进行过滤。
6.如权利要求1所述的微生物谷氨酰胺转胺酶的分离纯化方法，其特征在于，所述样品冻干前用纳米滤膜过滤。
7.如权利要求1所述的微生物谷氨酰胺转胺酶的分离纯化方法，其特征在于，所述微生物谷氨酰胺转胺酶的得率大于70%。
8.如权利要求1所述的微生物谷氨酰胺转胺酶的分离纯化方法，其特征在于，所述微生物谷氨酰胺转胺酶的内毒素水平<4EU/g。
9.如权利要求1所述的微生物谷氨酰胺转胺酶的分离纯化方法，其特征在于，所述微生物谷氨酰胺转胺酶可用做伤口止血和医用粘合材料。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于华东师范大学，未经华东师范大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201210276705.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
