[发明专利]榉树组织培养快速繁殖方法无效
申请号: | 201210273106.X | 申请日: | 2012-08-03 |
公开(公告)号: | CN102792890A | 公开(公告)日: | 2012-11-28 |
发明(设计)人: | 金晓玲;何平;胡希军;张日清;廖飞勇;汪灵丹 | 申请(专利权)人: | 中南林业科技大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人: | 郭立中 |
地址: | 410004 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 组织培养 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种榉树组织培养快速繁殖方法,包括如下步骤:
(1)将榉树幼嫩枝条用 75%的酒精消毒25~35s,用无菌水冲洗,用0.1%升汞消毒8~12min, 再用无菌水冲洗;
(2)将经步骤(1)处理后的枝条切成长0.8~1.2cm至少含有一个腋芽的茎段,植入丛生芽诱导培养基中培养28~32天,获得丛生芽;其中,所述丛生芽诱导培养基为:WPM+1.0 ~3.0 mg.L-1 BA + 0~1.0 mg.L-1NAA,琼脂6.5 g.L-1 , 蔗糖20 g.L-1, pH值为5.7;
(3)将经步骤(2)诱导培养后长出的丛生芽转入继代培养基中培养60~65天,进行芽的增殖,;其中,所述继代培养基为: WPM+2.0~3.0 mg.L-1 BA+1.0~2.0 mg.L-1NAA,琼脂6.5 g.L-1 , 蔗糖20 g.L-1,pH值为5.7;
(4)切取经步骤(3)继代培养后长出的高度为2.0cm以上的榉树健壮苗,植入生根培养基中培养45~50天,获得再生植株;其中,所述生根培养基为:WPM+0.5~1.0 mg.L-1 IBA+2.0 g.L-1AC,琼脂7.0 mg L-1, 蔗糖20 g.L-1,pH值为5.7;
(5)将经步骤(4)获得的再生植株洗净,移植到由泥炭土和珍珠岩组成的混合基质中炼苗培养7~10天,再室外培养90~100天,即可移至大田栽培。
2.如权利要求1所述榉树组织培养快速繁殖方法,其特征在于,步骤(1)所述榉树幼嫩枝条是当年生春季带芽幼嫩枝条。
3.如权利要求1所述榉树组织培养快速繁殖方法,其特征在于,步骤(1)所述榉树幼嫩枝条是将含腋芽的榉树冬季落叶的健壮枝条置于装有蒸馏水的烧杯中,25℃下进行水培15~30天后,由腋芽萌发而成的幼嫩枝条。
4.如权利要求1所述榉树组织培养快速繁殖方法,其特征在于,步骤(5)所述的混合基质中泥炭土和珍珠岩的体积比为1:1。
5.如权利要求1所述榉树组织培养快速繁殖方法,其特征在于,步骤(2)至(4)中的培养条件为:室温24 ± 2 ℃, 光照强度PPFD = 65.5 μ.moL.m-2.s-1,光照时间每天16 小时。
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