[发明专利]川明参组培快繁技术

权利要求书

1.一种川明参组织培养方法，其特征在于：以性状优良的川明参植株旺盛生长期的茎尖、幼嫩叶片以及新鲜幼嫩叶柄为外植体，经消毒处理、接种诱导形成愈伤组织；再经愈伤组织增殖、诱芽培养和生根培养，长成完整的川明参植株小苗；最后将完整小苗移栽至育苗基质中，培养成川明参种苗。

2.根据权利要求1所述的一种川明参组织培养方法，其特征在于：所述的川明参组织培养方法，其步骤如下：

1）外植体的选取与灭菌：选取川明参旺盛生长期的茎尖、幼嫩叶片以及新鲜幼嫩叶柄为外植体，以流水冲洗20~30min，再以75%酒精浸泡30s，以无菌去离子水冲洗3~5次，再将冲洗后的外植体置于0.1%~0.2%的升汞溶液中，浸泡灭菌10~15分钟，以无菌去离子水冲洗2~3次，以无菌滤纸吸干表面水分，备用；

2）外植体接种：将步骤1中备用的外植体切成0.5~1cm的小块，接种于愈伤组织诱导培养基中，培养时间为20~25天，在茎尖切口、幼嫩叶片切口周围、叶柄切口以及中间膨大处长出愈伤组织；

3）愈伤组织增值：将步骤2中得到的愈伤组织接种于愈伤组织增值培养基中，培养时间为15~20天，长出淡黄色或乳白色致密愈伤组织；

4）丛生芽诱导：将步骤3中得到的愈伤组织切取为黄豆大小块状，接种于丛生芽诱导培养基中，培养时间为20~30天，出现川明参丛生苗；

5）生根培养：将步骤4中得到的川明参丛生苗分株，转接至生根培养基中，培养时间为20~25天，小苗基部长出灰白短根，继续培养长出完整根系；

6）植株移栽：移栽前，对含泥炭土、珍珠岩的育苗基质进行消毒，将步骤5中得到的带根完整小苗移栽至育苗基质中，于温室中雾化保湿条件下培养，直至小苗存活，长成正常川明参植株。

3.根据权利要求1或2所述的一种川明参组织培养方法，其特征在于：所述的川明参为一年生或者2年生的处于生长期（11月~次年2月）的伞形科川明参属植物川明参（Chuanminshen violaceum）。

4.根据权利要求2所述的一种川明参的组织培养方法，其特征在于：所述的愈伤组织诱导培养基，为1/2MS+6-BA1.0~3.0mg/L+2,4-D10.0~20.0mg/L+NAA1.0~5.0mg/L。

5.根据权利要求2所述的一种川明参组织培养方法，其特征在于：所述的愈伤组织增值培养基，为MS+2,4-D10.0~20.0mg/L+NAA1.0~5.0mg/L。

6.根据权利要求2所述的一种川明参组织培养方法，其特征在于：所述的丛生芽诱导培养基，为MS+6-BA5.0~10.0mg/L+NAA1.0~5.0mg/L。

7.根据权利要求2所述的一种川明参组织培养方法，其特征在于：所述的生根培养基，为1/2MS+IBA1.0~10.0mg/L+NAA1.0~2.0mg/L。

8.根据权利要求4~7所述的一种川明参组织培养方法，其特征在于：所述的MS为常规基本培养基Murashige&Skoog1962，将常规基本培养基MS中大量元素浓度减半得到1/2MS，6-BA为6-苄基腺嘌呤，NAA为萘乙酸，2,4-D为2,4-二氯苯氧乙酸，IBA为吲哚丁酸。

9.根据权利要求2所述的一种川明参组织培养方法，其特征在于：所述的愈伤组织诱导培养基、愈伤组织增殖培养基、丛生芽诱导培养基和生根培养基均加入8g/L的琼脂、30g/L的蔗糖。

10.根据权利要求1或2所述的一种川明参组织培养方法，其特征在于：所述育苗基质，为泥炭土、珍珠岩等混合物，总孔隙度75%，有机质15%。