[发明专利]纳米氧化铜为催化剂的流动注射化学发光测定胆固醇的方法

说明书

技术领域

本发明涉及纳米氧化铜作为催化剂的流动注射化学发光测定胆固醇的方法，属于分析化学和纳米技术领域。 

背景技术

胆固醇水平异常可出现于贫血、败血症、营养不良高血压、冠状动脉心脏疾病、动脉硬化、脑栓塞、脂代谢紊乱、心肌梗死等疾病。因此测定血液和食品中的胆固醇水平，在临床诊断和食品质量控制领域受到了广泛关注。常见的胆固醇分析方法包括非酶法、比色法、高效液相色谱法和电化学方法等。然而，这些方法往往存在如特异性和选择性差，试剂不稳定，成本高和标准化困难等缺点。因此，建立高灵敏度，高选择性，低成本和方便快捷的胆固醇水平检测技术具有重要的意义。 

化学发光是基于反应体系中某些物质的分子吸收了反应所释放的能量而由基态跃迁到激发态，然后再由从激发态返回基态，同时将能量以光辐射的形式释放出来所产生的一种发光现象。基于分子发光强度和被测物质含量之间的关系建立的分析方法称为化学发光分析法。近年来化学发光法由于检测限低、测定快速、线性范围宽等优点已经在不同的领域引起了人们的广泛兴趣和关注，如分析化学、环境科学、临床医学等。 

近年来，对于化学发光的研究已拓展至以纳米材料来增加灵敏度和稳定性。纳米材料具有比表面积大、吸附性强、水溶性、高活性和高选择性等特性，随着纳米科技的发展，化学发光分析方法与纳米技术的结合无论是在优化化学发光反应的分析特性方面，还是在拓宽化学发光的应用范围等方面都获得了长足的发展。 

本发明利用胆固醇氧化酶催化胆固醇氧化产生过氧化氢，基于纳米氧化铜对过氧化氢氧化鲁米诺化学发光的催化作用，结合流动注射技术，提供了一种检测胆固醇的新方法。 

发明内容

本发明的目的是利用胆固醇氧化酶催化胆固醇氧化产生过氧化氢，基于纳米氧化铜对过氧化氢氧化鲁米诺化学发光的催化作用，结合流动注射技术，提供了一种检测胆固醇的新方法。 

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案： 

本发明所述的一种纳米氧化铜为催化剂的流动注射化学发光测定胆固醇的方法，包括如下步骤：将胆固醇、胆固醇氧化酶和磷酸盐缓冲溶液混合温浴后成反应液，将反应液稀释后，经蠕动泵运输进入混合器中与纳米氧化铜胶体溶液混合，而后与鲁米诺溶液混合，三者混合后进入流动池反应，产生的化学发光强度经光电倍增管检测以测定胆固醇。

本发明所述的纳米氧化铜为催化剂的流动注射化学发光测定胆固醇的方法，其特征是鲁米诺溶液pH值为11.5。 

本发明所述的纳米氧化铜为催化剂的流动注射化学发光测定胆固醇的方法，其特征是鲁米诺溶液浓度为0.2 mmol/L。 

本发明所述的纳米氧化铜为催化剂的流动注射化学发光测定胆固醇的方法，其特征是纳米氧化铜溶液浓度为1.0 mg/L。 

本发明所述的一种纳米氧化铜作为催化剂的流动注射化学发光测定奶粉中胆固醇的方法，由以下步骤组成：奶粉溶解于KOH/乙醇溶液中，水浴皂化，加入水和正己烷漩涡混匀，离心获得正己烷提取物；取正己烷提取物用氮气吹干，用体积比为18:7的异丙醇和Triton X-100混合溶剂重新溶解已吹干的正己烷提取物作为样品溶液；在EP管中分别加入上述的样品溶液、胆固醇氧化酶和磷酸盐缓冲溶液，所形成的混合液温浴形成反应液，将此反应液稀释，经蠕动泵运输进入混合器中与纳米氧化铜胶体溶液混合，而后与鲁米诺溶液混合，三者混合后进入流动池反应，产生的化学发光强度经光电倍增管检测以测定奶粉中胆固醇。