[发明专利]一种核酸检测方法有效
| 申请号： | 201210271932.0 | 申请日： | 2012-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN102827929A | 公开（公告）日： | 2012-12-19 |
| 发明（设计）人： | 姚波;林彩琴 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 核酸 检测 方法 | ||
1.一种核酸检测方法，包括：
(1)根据目标核酸分子的序列设计合成锁式探针和扩增引物；
(2)将待测的DNA或RNA的逆转录产物预处理后，与锁式探针、连接酶和缓冲液混合，连接反应后加热使连接酶变性失活；
(3)以连接产物为模板，利用扩增引物进行滚环扩增；
(4)滚环扩增完成后，往滚环扩增体系中添加磁珠，使扩增产物聚集，然后整体转移至滤纸上，晾干；
(5)肉眼观察滤纸表面，判断待测的DNA或RNA中是否含有目标核酸分子。
2.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述连接酶为Taq DNA连接酶、Ampligase DNA连接酶、Thermus thermophilus连接酶、T4DNA连接酶、T4RNA连接酶或E.coli DNA连接酶。
3.根据权利要求2所述的核酸检测方法，其特征在于，所述连接酶为Taq DNA连接酶、Ampligase DNA连接酶或Thermus thermophilus连接酶。
4.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述滚环扩增的时间为至少60分钟。
5.根据权利要求4所述的核酸检测方法，其特征在于，所述滚环扩增的时间为至少120分钟。
6.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述锁式探针长度为40～200bp。
7.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述扩增引物的长度10～40bp。
8.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述磁珠外表面修饰羧基、氨基或抗生物素蛋白。
9.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述磁珠直径为100nm～10μm。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于浙江大学，未经浙江大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201210271932.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
