[发明专利]一株解淀粉芽孢杆菌菌株的胞外多糖代谢产物提取及应用

权利要求书

1.一株解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens C-1，其特征在于：对其16s rRNA序列进行PCR扩增片段，测序后进行NCBI数据库的细菌16s rRNA序列比对，证实该分离株属于解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens，命名为解淀粉芽孢杆菌C-1，其16s rRNA序列NCBI登录号为JN974457，该菌现保存于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏号为CCTCC NO:M 2012177。

2.根据权利要求1所述的一株解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens C-1，其特征在于：产胞外多糖发酵、多糖的提取，G-14菌株在LB+1%葡萄糖的固体培养基上的菌苔呈白色、湿润、饱满；经过浓缩、沉淀、除蛋白、透析后得到B.amyloliquefaciens C-1胞外多糖提纯产物，产量为380mg/L，其中的糖蛋白浓度为0.7%。

3.根据权利要求1所述一株解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens C-1，其特征在于：B.amyloliquefaciens C-1胞外多糖还原能力见表1

表1

4.根据权利要求1所述一株解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens C-1，其特征在于：B.amyloliquefaciens C-1胞外多糖对DPPH自由基的清除作用见表2

表2

5.根据权利要求1所述一株解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens C-1，其特征在于：B.amyloliquefaciens C-1胞外多糖对羟自由基·OH的清除作用见表3

表3

6.根据权利要求1所述一株解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens C-1，其特征在于：胞外多糖对超氧阴离子O₂^-的清除作用见表4

表4

7.根据权利要求1所述一株解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens C-1，其特征在于：脂质过氧化抑制作用见表5

表5

8.根据权利要求1所述一株解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens C-1，其特征在于：解淀粉芽孢杆菌对人肿瘤细胞增殖的抑制结果见表6和表7

表6解淀粉芽孢杆菌提纯的胞外多糖2.5mg/ml对不同人肿瘤细胞生长的抑制率%

  肿瘤细胞种类  7901  A549  7721  MCF7  7402  HELA  抑制率%  73.2  65.0  64.0  57.7  41.1  78.6

表7解淀粉芽孢杆菌胞外多糖不同浓度对肿瘤细胞7901及HELA的抑制率

  胞外多糖浓度mg/ml  0.07  0.14  0.28  0.56  1.12  2.24  对7901的抑制率%  12.99  29.47  30.32  31.32  45.11  64.60  对HELA的抑制率%  10.50  22.68  23.46  40.50  43.70  61.87