[发明专利]一种水稻淀粉分支酶SBE3基因的突变基因及其用途有效
| 申请号: | 201210266649.9 | 申请日: | 2012-07-30 |
| 公开(公告)号: | CN102816778A | 公开(公告)日: | 2012-12-12 |
| 发明(设计)人: | 朴钟泽;杨瑞芳;张建明;白建江;楼素芬 | 申请(专利权)人: | 上海市农业科学院;上海昊洋农业科技发展有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/56 | 分类号: | C12N15/56;C12N9/44;C12Q1/68;C12Q1/34 |
| 代理公司: | 北京瑞恒信达知识产权代理事务所(普通合伙) 11382 | 代理人: | 李渤;张伟 |
| 地址: | 201403 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 水稻 淀粉 分支 sbe3 基因 突变 及其 用途 | ||
1.一种水稻淀粉分支酶SBE3基因的突变基因,其特征在于,所述突变基因在对应于水稻淀粉分支酶SBE3基因第16个外显子的第105位处具有T→C的碱基突变;
优选地,所述突变基因的核苷酸序列如SEQ ID NO. 1所示。
2.一种DNA核酸序列,其特征在于,所述DNA核酸序列的核苷酸序列如SEQ ID NO. 2所示。
3.根据权利要求1所述的突变基因或根据权利要求2所述的DNA核酸序列在筛选高抗性淀粉含量的水稻品种中的用途。
4.一种筛选高抗性淀粉含量的水稻品种的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
以扩增包含野生型水稻淀粉分支酶SBE3基因第16个外显子第105位的核酸序列为目标设计引物,然后采用该引物并以待筛选水稻的基因组DNA为模板进行PCR扩增,鉴定在得到的扩增产物中对应于水稻淀粉分支酶SBE3基因第16个外显子第105位处是否具有T→C的碱基突变。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
1)提取待筛选水稻的基因组DNA;
2)以该基因组DNA为模板,采用核苷酸序列如SEQ ID NO. 3和SEQ ID NO. 4所示的引物进行PCR扩增;以及
3)鉴定得到的扩增产物中在对应于水稻淀粉分支酶SBE3基因第16个外显子第105位处是否具有T→C的碱基突变。
6.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于,所述步骤3)中采用以下方式进行鉴定:
A. 对获得的扩增产物进行测序;和/或
B. 采用限制性内切酶SpeI对获得的扩增产物进行酶切鉴定。
7.一种用于筛选高抗性淀粉含量的水稻品种的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:能够扩增包含水稻淀粉分支酶SBE3基因第16个外显子第105位的核酸序列的PCR引物;
优选地,所述试剂盒还包括Taq DNA聚合酶、PCR缓冲体系和dNTP。
8.根据权利要求6或7所述的试剂盒,其特征在于,所述PCR引物的核苷酸序列如SEQ ID NO. 3和SEQ ID NO. 4所示;
优选地,所述试剂盒还包括限制性内切酶SpeI。
9.根据权利要求1所述的突变基因编码的蛋白;
优选地,所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO. 7所示。
10.根据权利要求2所述的DNA核酸序列编码的氨基酸序列。
11.根据权利要求9所述的蛋白或根据权利要求10所述的氨基酸序列在筛选高抗性淀粉含量的水稻品种中的用途。
12.一种筛选高抗性淀粉含量的水稻品种的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
获得待筛选水稻的水稻淀粉分支酶SBE3的氨基酸序列或其部分序列,然后鉴定该氨基酸序列中对应于水稻淀粉分支酶SBE3第599位处是否具有亮氨酸→脯氨酸的氨基酸突变。
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