[发明专利]一种SOD的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种酶的提取方法，具体涉及一种超氧化物歧化酶（SOD）的提取方法。

背景技术

SOD是超氧化物歧化酶（superoxide dismutase）的简称，国际酶学委员会的编码为EC 1.15.1.1，属于氧化还原类酶。

SOD是一种能够清除机体中过多自由基的活性物质，该物质与机体的衰老、肿瘤发生、自身免疫性疾病和辐射防护等密切有关，对治疗类风湿性关节炎、白内障、膀胱炎、皮肤病、红斑狼疮等疾病疗效较好。此酶无抗原性，不良反应小，副作用小，是一种医疗价值很高、具有广阔前途的药用酶。

SOD按金属辅基成分的不同分为三种，第一种是含有铜（Cu）锌（Zn）金属辅基的称（Cu.Zn—SOD），呈绿色，存在于机体细胞浆中；第二种是是含有锰（Mn）金属辅基的称（Mn—SOD），呈紫色，存在于真核细胞的线粒体和原核细胞内；第三种是含有铁（Fe）金属辅基的称（Fe—SOD），呈黄褐色，存在于原核细胞中。

SOD的分布极为广泛，迄今为止已从细菌、真菌、藻类、鱼类、昆虫和哺乳类动物等各种生物体分离得到。但是，从最早发现SOD到今天对SOD的开发应用，SOD大都是从动物的血液中分离提取。因此，公开的提取SOD的方式大多的是动物血液提取和分离。

由于分离提取SOD的动物血液的资源有限，代价也非常昂贵，进而造成原料紧张，成本增加。在分离提取SOD时，需要多次加入动物血液再多次分离该物质，使得分离提取工艺繁琐复杂，容易造成化学污染。另外，由于使用的是动物血液，提取SOD时还存在艾滋病等血液中病毒的交叉感染及其它潜在危险。国际卫生组织曾经呼吁：立刻停止从动物血液中提取的SOD的使用。

另外，来源于动物血液的SOD，是含有铜（Cu）锌（Zn）金属辅基的称为Cu.Zn—SOD）的单一性酶。

发明内容

本发明的目的是提供一种提取SOD的方法，该方法可以从植物中获得SOD。

本发明提供的SOD的提取方法包括以下步骤：

将刺梨果粉碎，获得刺梨果块；

对刺梨果块进行浸提，得到浸提液；

将浸提液进行离心分离，得到SOD粗酶液；

将SOD粗酶液进行超滤，得到SOD溶液；

将SOD溶液浓缩，得到SOD浓缩液；

将SOD浓缩液离心喷雾干燥得到SOD。

可选的，将SOD浓缩液离心喷雾干燥得到粉末状固体SOD。

可选的，将野生刺梨果粉碎，获得野生刺梨果块。

可选的，在60~70℃的纯净水中对刺梨果块进行恒温浸提8~12h。

可选的，将SOD粗酶液进行超滤进一步包括：

将SOD粗酶液通过一级滤膜，收集一级截留液；

用纯净水稀释一级截留液后再通过二级滤膜，收集二级通过液和二级截留液；

用纯净水稀释二级通过液后再通过三级滤膜，收集三级截留液；

将二级截留液和三级截留液合并得到为SOD溶液。

可选的，一级滤膜分子量为5000~10000，二级滤膜分子量为50000~80000，三级滤膜分子量为20000~40000。

可选的，对SOD溶液进行PH调节，使其范围在3.8~5.2之间。

可选的，在将刺梨果粉碎之前，还包括清洗刺梨果的步骤。

可选的，在清洗之后对刺梨果进行烘干的步骤，且在烘干过程中向刺梨果加硫磺。

可选的，将SOD溶液减压真空浓缩18~30min，得到SOD浓缩液。

本发明提供的SOD的提取方法是全物理方法提取SOD，只需要常用的简单设备即可完成，工艺简单，不存在危险；且提取过程中所使用的温度不高，条件温和，成品SOD常温下能够保存；由于采用了生物技术保活工艺，全物理处理工艺，故既无环境污染也没有内原性化学污染；进而该SOD的提取方法能够降低开发成本，是一种具备规模提取植物SOD的方法。

附图说明

图1是本发明实施例1提供的从野生刺梨中提取SOD的方法流程图。

图2是本发明实施例2提供的从野生刺梨中提取SOD的方法流程图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明提供的技术方案进行详细描述，本部分的描述仅是示范性和解释性，不应视为对本发明公开技术内容的限制。