[发明专利]一种棉花纤维中单宁的提取及含量检测的方法无效
申请号: | 201210265375.1 | 申请日: | 2012-07-27 |
公开(公告)号: | CN102759469A | 公开(公告)日: | 2012-10-31 |
发明(设计)人: | 杨伟华;郁有祝;郭玉华;许红霞;王延琴;周大云;匡猛;冯新爱;方丹 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院棉花研究所 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N21/31 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞;张庆敏 |
地址: | 455000 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 棉花 纤维 单宁 提取 含量 检测 方法 | ||
技术领域
本发明属于有机化学领域,具体为一种棉花纤维中的单宁的提取和检测的方法。
背景技术
单宁是棉花植株内一种重要的次生物质,是一类包括缩合及水解单宁在内的黄酮类化合物,它对棉铃虫、黄萎病在内的所有主要病虫害都有一定的抗性作用,为此近年来倍受关注。
对于棉花植株中单宁含量的测定已有报道,如我国学者、国外学者Hedin等(1992年)测定了一些陆地棉和亚洲棉品种的黄酮类化合物在棉株上的分布结果表明,在陆地棉中叶、蕾、铃的含量依次为4.38%、2.12%和2.09%;在亚洲棉中叶、蕾、铃的含量依次为2.18%、2.37%和4.55%。武予清等采用正丁醇盐酸法和香草醛法测定了棉花植株中各个组织缩合单宁的含量,花萼、铃皮和叶片缩合单宁含量较高(5%~10%),花瓣、花柱子房和铃心中含量较低(2%左右),但对于成熟棉花纤维中单宁提取及含量测定尚未报道。
因此,提出一种成熟棉花纤维中单宁提取及含量测定的简单、准确的方法,对于监测贮存过程中棉花纤维中单宁含量的变化、控制棉花品级与品质下降具有重要意义。本发明的发明人在工作实践中,进行了大量的试验与比较研究,从单宁提取最佳条件的选择到FoLin酚还原法检测单宁含量方法的建立都进行了非常详细认真的试验研究,并提出一种棉花纤维中的单宁的提取和检测的方法。
发明内容
针对本领域研究方面之不足,本发明的目的是提出一种棉花纤维中单宁的提取方法。
本发明的另一目的是提出一种棉花纤维中单宁的含量检测方法。
实现本发明目的的具体技术方案为:
一种棉花纤维中单宁的提取方法,其提取步骤包括:向棉花纤维样品中加入丙酮溶液使棉花纤维充分浸透,加热同时冷凝回流,然后冷却至室温。
其中,所述丙酮溶液为体积比1:0.5-2的丙酮水溶液。
其中,所加丙酮溶液的量为每克棉花纤维样品中加入丙酮溶液5-25mL,优选12-18mL。
其中,所述加热冷凝回流的温度为65-95℃,优选为85℃。
其中,所述加热同时冷凝回流的时间为15-90min,优选为60min。在优选的提取用丙酮用量及加热冷凝回流的温度、时间条件下提出的单宁含量最高。
一种棉花纤维中单宁的含量检测方法,是使用本发明所提出的方法得到棉花纤维的单宁提取液,向提取液中加入F-D试剂(Folin-Denis试剂,又称佛丹二氏试剂)和饱和碳酸钠,静置,在750-780nm波长下测定吸光度。
其中,所述单宁提取液与F-D试剂的体积比为:1:0.5-2.5,优选为1:0.6。
其中,所述饱和碳酸钠与单宁提取液的体积比为1:0-2.5,优选1:1.4。
其中,所述静置的时间为5-50min,优选为25min。优选的提取液与F-D试剂的体积比、静置时间条件下,显色测得的吸光度值最大,从而测得的单宁含量最高。
本发明的优良效果在于:
通过考察影响单宁提取率的三个因素(提取液用量、提取温度、提取时间)和FoLin酚还原法检测单宁含量的影响因素(F-D试剂的用量、饱和Na2CO3用量、显色时间),建立了一种适用于棉花纤维中单宁提取及含量检测的方法,用该方法对实际棉花样品进行检测,结果准确可靠,而且该方法经济简单、快速易行。
附图说明
图1为单宁酸溶液的标准曲线。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
实验例:提取和检测条件的比较和选择
1)单宁提取条件(丙酮溶液用量)的比较和选择步骤为:称取2±0.5g棉花纤维5份,分别放入100mL烧瓶中,向烧瓶中依次加入1:1丙酮溶液10mL、20mL、24mL、30mL、36mL、40mL、50mL,并用玻璃棒将棉花纤维全部浸透,在85℃水浴中加热60min同时冷凝回流,冷却至室温,得提取液。依次从烧瓶中吸取1mL提取液加入盛有约6mL水的10mL试管中,摇匀。分别加F-D试剂0.6mL,摇匀,加饱和Na2CO3溶液1.4mL,定容摇匀,静置30min后在760nm处测其吸光度。加入1:1丙酮溶液10mL、20mL、24mL、30mL、36mL、40mL、50mL测得的吸光度分别为0.187、0.226、0.282、0.358、0.259、0.132、0.113,其中最大值为加入丙酮溶液为24-36ml的样品的吸光度值。
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